[发明专利]牛卵母细胞体外受精胚胎培养的方法和所用的培养基

摘要

本发明涉及牛卵母细胞体外受精胚胎培养的方法和所用的培养基。这种基础培养基是包含氯化钠、磷酸二氢钠、碳酸氢钠、醋酸钠等的水溶液。还涉及一种洗卵液和成熟培养液。其中牛体外受精胚胎培养的方法，包括如下步骤：卵母细胞的采集和体外成熟；体外受精；胚胎体外培养及保存。本发明牛体外受精胚胎培养的方法具有如说明书所述优异的技术效果。

主权项

1.一种基础培养液，其是包含如下组分的水溶液：氯化钙180～220mg/L、九水硝酸铁0.70～0.75mg/L、氯化钾380～420mg/L、硫酸镁90～100mg/L、氯化钠6500～7000mg/L、一水磷酸二氢钠130～150mg/L、碳酸氢钠2000～2500mg/L、醋酸钠40～60mg/L、L‑丙氨酸20～30mg/L、L‑精氨酸盐酸盐60～80mg/L、L‑天冬氨酸25～35mg/L、L‑半胱氨酸盐酸盐一水合物0.10～0.12mg/L、L‑胱氨酸二盐酸盐20～30mg/L、L‑谷氨酸70～80mg/L、甘氨酸40～60mg/L、L‑组氨酸盐酸盐一水合物20～25mg/L、L‑羟脯氨酸8～12mg/L、L‑异亮氨酸15～25mg/L、L‑亮氨酸50～70mg/L、L‑赖氨酸盐酸盐60～80mg/L、L‑蛋氨酸10～20mg/L、L‑苯丙氨酸20～30mg/L、L‑脯氨酸30～50mg/L、L‑丝氨酸20～30mg/L、L‑苏氨酸25～35mg/L、L‑色氨酸8～12mg/L、L‑酪氨酸二钠二水合物55～60mg/L、L‑缬氨酸20～30mg/L、抗坏血酸0.04～0.06mg/L、α‑D‑生育酚磷酸酯0.008～0.012mg/L、生物素0.008～0.012mg/L、骨化醇0.08～0.12mg/L、D‑泛酸钙0.008～0.012mg/L、氯化胆碱0.4～0.6mg/L、叶酸0.008～0.012mg/L、肌醇0.04～0.06mg/L、三水合甲萘醌亚硫酸氢钠0.015～0.025mg/L、烟酸0.02～0.03mg/L、烟酰胺0.02～0.03mg/L、p‑氨基苯甲酸0.04～0.06mg/L、盐酸吡哆辛0.04～0.06mg/L、核黄素0.008～0.012mg/L、盐酸硫胺素0.008～0.012mg/L、维生素A乙酸酯0.1～0.2mg/L、硫酸腺嘌呤8～12mg/L、腺嘌呤0.15～0.25mg/L、腺苷三磷酸二钠0.8～1.2mg/L、胆固醇0.15～0.25mg/L、2‑脱氧‑D‑核糖0.4～0.6mg/L、D‑葡萄糖800～1200mg/L、谷胱甘肽0.04～0.06mg/L、盐酸鸟嘌呤0.25～0.35mg/L、次黄嘌呤钠0.3～0.4mg/L、核糖0.4～0.6mg/L、胸腺素0.25～0.35mg/L、吐温804～6mg/L、尿嘧啶0.25～0.35mg/L、黄嘌呤钠0.3～0.4mg/L、酚红8～12mg/L。