[发明专利]水稻受体蛋白RGA5A_S的制备及结晶方法有效

专利信息
申请号: 201810475252.8 申请日: 2018-05-17
公开(公告)号: CN110498847B 公开(公告)日: 2021-06-22
发明(设计)人: 刘俊峰;郭力维;刘强 申请(专利权)人: 中国农业大学
主分类号: C07K14/415 分类号: C07K14/415;C07K1/22;C07K1/16;C12N15/29;C12N15/70;C30B7/00
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 王文君;黄爽
地址: 100193 *** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明公开了水稻受体蛋白RGA5A_S的制备及结晶方法。蛋白RGA5A_S的制备方法为:利用原核表达系统表达水稻受体蛋白RGA5A_S,经过菌体裂解,裂解上清液依次过亲和层析柱、分子筛层析柱,最终得到纯化的目的蛋白;针对蛋白RGA5A_S包含金属离子结构域的特点,在重组菌诱导摇培时,向培养基中添加100μM Zn2+,提高了蛋白稳定性。本发明还提供蛋白RGA5A_S的结晶方法。采用鸟枪法和九宫格法对蛋白结晶条件进行筛选优化,结果蛋白RGA5A_S在0.18‑0.22MNH4NO3和18%‑22%PEG3350条件下,所得晶体大、质量好、分辨率高,该方法重复性好。
搜索关键词: 水稻 受体 蛋白 rga5a_s 制备 结晶 方法
【主权项】:
1.水稻受体蛋白RGA5A_S的制备方法,其特征在于,利用原核表达系统表达水稻受体蛋白RGA5A_S,经过菌体裂解,裂解上清液依次过亲和层析柱、分子筛层析柱,最终得到纯化的目的蛋白;/n其中,重组菌诱导摇培时,培养基中添加100μM Zn2+。/n
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