[发明专利]一种鉴别蜂蜜真伪的方法

摘要

本发明公开了一种鉴别蜂蜜真伪的方法，包括以下步骤：步骤1、高聚合度寡糖的富集；步骤2、薄层层析分离寡糖并对蜂蜜样品定性分析；步骤3、用扫描仪扫描后用Image J软件对蜂蜜样品进行掺假定量分析。该方法针对蜂蜜中掺入果葡糖浆的造假方式，通过对蜂蜜中聚合度大于五的寡糖定性、定量分析来鉴别蜂蜜真伪。

主权项

1.一种鉴别蜂蜜真伪的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、高聚合度寡糖的富集1.1溶解：取2g待测蜂蜜样品溶于10mL水中；1.2洗脱：取上述待测蜂蜜样品溶液10mL上样于岛津蜂蜜中寡糖专用固相萃取小柱，SHIMADZU Special SPE Column Oligosaccharides in honey，200mg硅藻土/500mg活性炭/200mg硅藻土/6mL，30/p，用体积分数20％的乙醇溶液50mL流经固相萃取柱，洗掉单糖、二糖，弃去清洗液；用50％乙醇溶液15mL冲洗固相萃取柱，收集洗脱液；1.3浓缩：收集的洗脱液40℃减压浓缩至干，向残渣中加200μL水涡旋复溶；步骤2、薄层层析分离寡糖2.1点样：各取3μL步骤1浓缩液和浓度2mg/mL的一至七糖标准品，点样于POLYGRAM Sillca gel UV254TLC分析板；2.2展开：采用二次展开法，第一次展开剂的配比为V乙酸：V乙酸乙酯：V水＝2:2:1.4，展距11cm；第二次展开剂的配比为V乙酸：V乙酸乙酯：V水＝2:2.6:1.4，展距15cm；2.3显色：显色剂为苯胺‑二苯胺‑磷酸溶液，展开结束后，将显色剂均匀喷洒在TLC分析板上，用烘干箱85℃烘干30min；2.4待测蜂蜜样品的定性分析：由于天然蜂蜜中不含聚合度五以上的寡糖，掺入果葡糖浆的蜂蜜含有聚合度五以上的寡糖，故依据步骤2.3显色结果进行定性分析，将待测蜂蜜样品的层析结果与标准品对比，若存在聚合度五以上的寡糖则判断该样品为掺假蜂蜜，并继续下述步骤对掺假蜂蜜进行掺假定量分析；步骤3、用Image J软件对掺假蜂蜜样品进行掺假定量分析3.1获取扫描图像：用Epson Perfection V19扫描仪扫描步骤2.3TLC分析板获取图像，各项参数的设置为：颜色全彩，分辨率400dpi，亮度和对比度设置为默认，图片以JPEG格式保存；3.2Image J图像分析：将Image J软件安装在电脑上，Windows、Mac OS的平台上均能运行；3.3数据处理。