[发明专利]绿色荧光蛋白纳米抗体的编码基因及其制备方法和应用有效
申请号: | 201810400122.8 | 申请日: | 2018-04-28 |
公开(公告)号: | CN108753792B | 公开(公告)日: | 2021-09-24 |
发明(设计)人: | 容益康;裘建香;李凯丽 | 申请(专利权)人: | 中山大学 |
主分类号: | C12N15/13 | 分类号: | C12N15/13;C12N15/70;C12N1/21;C07K16/18 |
代理公司: | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人: | 张芬 |
地址: | 510275 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明涉及四个绿色荧光蛋白(GFP)纳米抗体编码基因,及其制备方法和应用。本发明构建了GFP纳米抗体文库。利用噬菌体展示技术,从该抗体文库中筛选到了四个特异结合GFP的纳米抗体,分别命名为A12、E6、D5和B9。测序获得了这四个纳米抗体基因的核苷酸序列,如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示,其对应的氨基酸序列如SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示。将A12基因克隆到改造的表达载体pADL‑10b‑His中,并导入SS320菌株中;将E6、D5和B9基因分别克隆到改造的表达载体pBAD24‑Flag‑His中,并分别导入TOP10菌株中,从而获得了四个纳米抗体的原核表达载体和菌株。本发明表达纯化了四个纳米抗体并证明了四个GFP纳米抗体能够特异结合GFP,可应用于基础研究中对GFP的检测。 | ||
搜索关键词: | 绿色 荧光 蛋白 纳米 抗体 编码 基因 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
1.绿色荧光蛋白纳米抗体的编码基因,其特征在于:所述编码基因包括四种绿色荧光蛋白纳米抗体的编码基因,其核苷酸序列分别如序列表SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示。
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