[发明专利]一种异育银鲫尾鳍细胞系的构建方法及其应用有效
| 申请号： | 201810357416.7 | 申请日： | 2018-04-20 |
| 公开（公告）号： | CN108546672B | 公开（公告）日： | 2021-06-25 |
| 发明（设计）人： | 鲁建飞;吕利群;许丹;费越越;王浩;姜有声 | 申请（专利权）人： | 上海海洋大学 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12Q1/70;C12Q1/686;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 上海伯瑞杰知识产权代理有限公司 31227 | 代理人： | 胡永宏 |
| 地址： | 201306 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： |
本发明公开了一种异育银鲫尾鳍细胞系的构建方法及其应用，包括：将健康异育银鲫尾鳍的尾鳍剪下，用75％的酒精消毒处理后剪成大小为1‑2mm |
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| 搜索关键词： | 一种 异育银鲫 尾鳍 细胞系 构建 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种异育银鲫尾鳍细胞系的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)原代培养：将健康异育银鲫尾鳍的尾鳍剪下，用75％的酒精消毒处理后用镊子刮除表面黏液，然后剪成大小为1‑2mm3的组织块，均匀移植到培养瓶后将培养瓶翻转，并置于25℃的恒温培养箱中，6h后加入5mL完全培养液，每3天更换2.5mL上述完全培养液；(2)传代培养：在显微镜下观察细胞生长情况，待细胞汇合至95％以上时加入1mL胰蛋白酶消化液，部分细胞开始脱落后用上述完全培养液吹打使细胞重悬，以1：2(v/v)分瓶传代培养，细胞传至10代后，将所述完全培养液的胎牛血清浓度降至10％；然后按照上述步骤继续传代培养至细胞稳定传代，得异育银鲫尾鳍细胞系。
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