[发明专利]一种荧光定量PCR技术检测意大利蜜蜂6-丙酮酰四氢蝶呤合酶PTS基因表达的方法在审
| 申请号： | 201810326195.7 | 申请日： | 2018-04-12 |
| 公开（公告）号： | CN108384839A | 公开（公告）日： | 2018-08-10 |
| 发明（设计）人： | 舒蕊 | 申请（专利权）人： | 安徽省农业科学院蚕桑研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6851 | 分类号： | C12Q1/6851;C12Q1/6876 |
| 代理公司： | 合肥中博知信知识产权代理有限公司 34142 | 代理人： | 钱卫佳 |
| 地址： | 230000 安徽省*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种荧光定量PCR技术检测意大利蜜蜂6‑丙酮酰四氢蝶呤合酶PTS基因表达的方法，具体涉及生物技术领域，本发明中意大利蜜蜂PTS实时荧光RT‑PCR检测方法的建立，包括以下步骤：(1)使用引物进行基因的检测和获得；(2)总RNA的提取；(3)cDNA合成；(4)实时荧光PCR；(5)意大利蜜蜂工蜂、雄蜂和蜂王PTS基因的相对表达量计算；本发明采用的实时荧光RT‑PCR与常规PCR相比，实时荧光PCR技术由自动化仪器收集荧光信号，避免了肉眼判断的主观性，进一步提高灵敏度；实时荧光RT‑PCR技术全封闭反应，无须PCR后处理，避免污染，保证结果的可靠性和重复性。同时，免除常规PCR中电泳、定量扫描等后续繁琐步骤，大大缩短实验时间。 | ||
| 搜索关键词： | 蜜蜂 实时荧光 实时荧光PCR 荧光定量PCR 技术检测 四氢蝶呤 常规PCR 丙酮 合酶 生物技术领域 全封闭反应 相对表达量 自动化仪器 后处理 电泳 避免污染 繁琐步骤 肉眼判断 荧光信号 灵敏度 主观性 总RNA 蜂王 工蜂 雄蜂 引物 扫描 基因 检测 保证 | ||
【主权项】：
1.一种荧光定量PCR技术检测意大利蜜蜂6‑丙酮酰四氢蝶呤合酶PTS基因表达的方法，其特征在于，它是由符合荧光RT‑PCR反应特点的特异性上下游引物，如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。
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