[发明专利]一种临床检测HBV cccDNA的微滴式数字PCR方法及试剂盒有效
| 申请号： | 201810292776.3 | 申请日： | 2018-03-30 |
| 公开（公告）号： | CN108285931B | 公开（公告）日： | 2021-01-01 |
| 发明（设计）人： | 刘松梅;黄景涛 | 申请（专利权）人： | 武汉大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12Q1/6886 |
| 代理公司： | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 彭劲松 |
| 地址： | 430072 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种临床检测HBV cccDNA的微滴式数字PCR方法及试剂盒，属于生物检测技术领域。本发明方法包括如下步骤：提取待测样本DNA，使用cccDNA引物对和探针(SEQ ID NO.1‑3所示)对PSAD酶消化后的DNA样本进行cccDNA定量，使用管家基因引物对和探针对未经PSAD酶消化的DNA样本进行管家基因定量标化肝细胞数目。本发明试剂盒包含用于扩增HBV cccDNA和管家基因的引物对和探针，阴性质控品和阳性质控品，ddPCR试剂和PSAD酶消化试剂。本发明检测全过程操作简单、省时，为临床患者的多种来源标本的cccDNA定量检测提供了一种新的高灵敏度方法和试剂盒。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 临床 检测 hbv cccdna 微滴式 数字 pcr 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
1.一种HBV cccDNA定量检测ddPCR试剂盒，其特征在于：包含用于扩增HBV cccDNA的cccDNA引物对和探针，以及用于扩增管家基因的引物对和探针；其中，用于扩增HBV cccDNA的cccDNA引物对和探针为：cccDNA‑F：5’‑TTCTCCGTCTGCCGTTCC‑3’，cccDNA‑R：5’‑CACAGCTTGGAGGCTTGA‑3’，cccDNA‑probe：5’‑荧光基团‑CACCAAATATTGCCCAAGGT‑淬灭基团‑3’。
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