[发明专利]一种PTEN-Long蛋白纯化制备方法在审
| 申请号： | 201810264951.8 | 申请日： | 2018-03-28 |
| 公开（公告）号： | CN108504671A | 公开（公告）日： | 2018-09-07 |
| 发明（设计）人： | 李宏;张谢;谭麟;林剑 | 申请（专利权）人： | 宁波市医疗中心李惠利医院 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C07K14/47;C07K1/14;C07K1/22;C07K1/34;C12N9/16 |
| 代理公司： | 深圳市顺天达专利商标代理有限公司 44217 | 代理人： | 蔡晓红;柯夏荷 |
| 地址： | 315040*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 一种PTEN‑Long蛋白纯化制备方法，包括以下步骤：S100.将PTEN‑Long质粒转入感受态细菌，获得转入质粒后的感受态细菌的菌落；S200.挑取若干个所述菌落，对若干个所述菌落中的细菌进行扩增以获得具有目标细菌浓度的第二菌液，并对所述具有目标细菌浓度的第二菌液中的细菌进行蛋白诱导得到蛋白诱导后的菌体；S300.裂解所述菌体，获得初级PTEN‑Long蛋白液；S400.用镍柱纯化所述初级PTEN‑Long蛋白液得到二级PTEN‑Long蛋白液；S500.对所述二级PTEN‑Long蛋白液进行脱盐及浓缩以收集所述二级PTEN‑Long蛋白液中的PTEN‑Long蛋白。采用本发明提供的PTEN‑Long蛋白纯化制备方法，只需要一次镍柱纯化即可制备出PTEN‑Long蛋白，且利用本发明制备的PTEN‑Long蛋白纯度更高，制备出的PTEN‑Long蛋白的表达率在80％以上。 | ||
| 搜索关键词： | 制备 蛋白液 蛋白纯化 菌落 感受态细菌 蛋白 蛋白诱导 目标细菌 菌体 菌液 镍柱 质粒 细菌 转入 蛋白纯度 扩增 裂解 脱盐 浓缩 | ||
【主权项】：
1.一种PTEN‑Long蛋白纯化制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S100.将PTEN‑Long质粒转入感受态细菌，获得转入质粒后的感受态细菌的菌落；S200.挑取若干个所述菌落，对若干个所述菌落中的细菌进行扩增以获得具有目标细菌浓度的第二菌液，并对所述具有目标细菌浓度的第二菌液中的细菌进行蛋白诱导得到蛋白诱导后的菌体；S300.裂解所述菌体，获得初级PTEN‑Long蛋白液；S400.用镍柱纯化所述初级PTEN‑Long蛋白液得到二级PTEN‑Long蛋白液；S500.对所述二级PTEN‑Long蛋白液进行脱盐及浓缩以收集所述二级PTEN‑Long蛋白液中的PTEN‑Long蛋白。
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