[发明专利]构建LCAT基因敲除仓鼠模型的系统和方法有效
| 申请号： | 201810201435.0 | 申请日： | 2018-03-12 |
| 公开（公告）号： | CN108410873B | 公开（公告）日： | 2020-05-26 |
| 发明（设计）人： | 冼勋德 | 申请（专利权）人： | 河北伊维沃生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/89;C12N15/90;A01K67/027 |
| 代理公司： | 石家庄国为知识产权事务所 13120 | 代理人： | 郝伟 |
| 地址： | 050000 河北*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种构建卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)基因敲除仓鼠模型的系统和方法，所述系统包括仓鼠LCAT基因特异性打靶序列sgRNA和放大sgRNA的PCR引物。所述方法包括：设计所述仓鼠LCAT基因特异性打靶序列、制备所述cas9mRNA和sgRNA；收集和培养仓鼠受精卵；显微注射：将所述sgRNA和cas9 mRNA共同注射至仓鼠受精卵的细胞质中；最后将显微注射后的受精卵植入代孕仓鼠体内，F1代仓鼠出生，经鉴定构建了LCAT基因敲除的仓鼠模型。 | ||
| 搜索关键词： | 构建 lcat 基因 仓鼠 模型 系统 方法 | ||
【主权项】：
1.构建LCAT基因敲除仓鼠模型的系统，其特征在于，所述系统包括仓鼠LCAT基因特异性打靶序列和sgRNA：所述仓鼠LCAT基因特异性打靶序列如SEQ ID NO:1所示；所述sgRNA的制备：采用如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示人工序列，经PCR扩增，取扩增产物中124bp的DNA片段作为sgRNA的DNA模板，所得的sgRNA的DNA模板经体外转录得sgRNA粗品。
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