[发明专利]一种用于治疗跟腱病的穴位注射用药物注射剂及其制法

摘要

本发明属于中药领域，具体涉及一种肿节风注射液及其制备方法，发明名称为一种用于治疗跟腱病的穴位注射用药物注射剂及其制法，本发明的肿节风注射液是由活性药物肿节风提取液制成。本发明提供了该肿节风注射液的制备方法，还提供了该注射液的检测方法。该肿节风注射液可用于治疗跟腱病，可以改善跟腱组织的进一步恶化，并对跟腱修复有积极的促进作用。 1

主权项

1.一种治疗跟腱病的肿节风注射液，其特征在于，由活性药物和药物辅料组成，所述活性药物为肿节风提取液。

2.一种治疗跟腱病的肿节风注射液的制备方法，其特征在于，步骤如下：

(1)取肿节风药材，加入8～12倍量90％～100％的乙醇浸泡5～15min，用闪式提取器提取2～4次，提取功率为5～7kw，转速为3500～4500r/min，每次提取时间为2～4min，提取液合并，过滤，滤液减压浓缩，得浸膏A；

(2)取步骤(1)所得浸膏A，加13～17倍量的水，进行悬浮，再用乙酸乙酯萃取，分取乙酸乙酯液，减压回收乙酸乙酯，得浸膏B；

(3)取步骤(2)所得的浸膏B，用真空柱层析进行色谱分离，以正相硅胶为填料，色谱柱的径高比为1:7～9，上样体积为8～12BV，以石油醚‑乙酸乙酯溶剂为洗脱剂，进行梯度洗脱，先以体积比为50:1的石油醚‑乙酸乙酯溶剂洗脱，洗脱剂用量为2～4BV，流速为0.5～1.5BV/h，弃去洗脱液，再以体积比为40:1的石油醚‑乙酸乙酯溶剂洗脱，洗脱剂用量为2～4BV，流速为0.5～1.5BV/h，弃去洗脱液，再以体积比为30:1的石油醚‑乙酸乙酯溶剂洗脱，洗脱剂用量为2～4BV，流速为0.5～1.5BV/h，弃去洗脱液，再以体积比为20:1的石油醚‑乙酸乙酯溶剂洗脱，洗脱剂用量为2～4BV，流速为0.5～1.5BV/h，弃去洗脱液，再以体积比为10:1的石油醚‑乙酸乙酯溶剂洗脱，洗脱剂用量为7～9BV，流速为1～3BV/h，收集洗脱液，再以体积比为5:1的石油醚‑乙酸乙酯溶剂洗脱，洗脱剂用量为7～9BV，流速为1～3BV/h，收集洗脱液，将收集到的洗脱液合并，浓缩，得浸膏C；

(4)取步骤(3)所得的浸膏C，上LH‑20型凝胶柱色谱，色谱柱的径高比为1:9～11，上样体积为7～9BV，以体积比为1:1的二氯甲烷‑甲醇溶液为洗脱剂，洗脱剂用量为9～11BV，流速为0.5～1.5BV/h，洗脱收集洗脱液，浓缩，得浸膏D；

(5)取步骤(4)所得的浸膏D，加入15～25倍量的水，滤过，滤液用盐酸水溶液调pH值至5～7，加活性炭适量，滤过，滤液加注射用水稀释，再次滤过，加聚山梨酯80，搅匀，调pH值至5～6调pH值至5～6，用微孔滤膜滤过，滤液分装，灌封，灭菌，即得。

3.如权利要求2所述的治疗跟腱病的肿节风注射液的制备方法，其特征在于，步骤如下：

(1)取肿节风药材，加入10倍量95％的乙醇浸泡10min，用闪式提取器提取3次，提取功率为6kw，转速为4000r/min，每次提取时间为3min，3次的提取液合并，过滤，滤液减压浓缩，得浸膏A；

(2)取步骤(1)所得浸膏A，加15倍量的水，进行悬浮，再用乙酸乙酯萃取，分取乙酸乙酯液，减压回收乙酸乙酯，得浸膏B；

(3)取步骤(2)所得的浸膏B，用真空柱层析进行色谱分离，以正相硅胶为填料，色谱柱的径高比为1:8，上样体积为10BV，以石油醚‑乙酸乙酯溶剂为洗脱剂，进行梯度洗脱，先以体积比为50:1的石油醚‑乙酸乙酯溶剂洗脱，洗脱剂用量为3BV，流速为1BV/h，弃去洗脱液，再以体积比为40:1的石油醚‑乙酸乙酯溶剂洗脱，洗脱剂用量为3BV，流速为1BV/h，弃去洗脱液，再以体积比为30:1的石油醚‑乙酸乙酯溶剂洗脱，洗脱剂用量为3BV，流速为1BV/h，弃去洗脱液，再以体积比为20:1的石油醚‑乙酸乙酯溶剂洗脱，洗脱剂用量为3BV，流速为1BV/h，弃去洗脱液，再以体积比为10:1的石油醚‑乙酸乙酯溶剂洗脱，洗脱剂用量为8BV，流速为2BV/h，收集洗脱液，再以体积比为5:1的石油醚‑乙酸乙酯溶剂洗脱，洗脱剂用量为8BV，流速为2BV/h，收集洗脱液，将收集到的洗脱液合并，浓缩，得浸膏C；

(4)取步骤(3)所得的浸膏C，上LH‑20型凝胶柱色谱，色谱柱的径高比为1:10，上样体积为8BV，以体积比为1:1的二氯甲烷‑甲醇溶液为洗脱剂，洗脱剂用量为10BV，流速为1BV/h，洗脱收集洗脱液，浓缩，得浸膏D；

(5)取步骤(4)所得的浸膏D，加入20倍量的水，滤过，滤液用盐酸水溶液调pH值至6，加活性炭适量，滤过，滤液加注射用水稀释至5000mL，再次滤过，加5mL聚山梨酯80，搅匀，调pH值至5.5，用0.46μm微孔滤膜滤过，滤液分装，灌封，灭菌，即得。

4.一种治疗跟腱病的肿节风注射液的检测方法，该肿节风注射液是采用如下的制备方法制备：

(1)取肿节风药材，加入8～12倍量90％～100％的乙醇浸泡5～15min，用闪式提取器提取2～4次，提取功率为5～7kw，转速为3500～4500r/min，每次提取时间为2～4min，提取液合并，过滤，滤液减压浓缩，得浸膏A；

(2)取步骤(1)所得浸膏A，加13～17倍量的水，进行悬浮，再用乙酸乙酯萃取，分取乙酸乙酯液，减压回收乙酸乙酯，得浸膏B；

(3)取步骤(2)所得的浸膏B，用真空柱层析进行色谱分离，以正相硅胶为填料，色谱柱的径高比为1:7～9，上样体积为8～12BV，以石油醚‑乙酸乙酯溶剂为洗脱剂，进行梯度洗脱，先以体积比为50:1的石油醚‑乙酸乙酯溶剂洗脱，洗脱剂用量为2～4BV，流速为0.5～1.5BV/h，弃去洗脱液，再以体积比为40:1的石油醚‑乙酸乙酯溶剂洗脱，洗脱剂用量为2～4BV，流速为0.5～1.5BV/h，弃去洗脱液，再以体积比为30:1的石油醚‑乙酸乙酯溶剂洗脱，洗脱剂用量为2～4BV，流速为0.5～1.5BV/h，弃去洗脱液，再以体积比为20:1的石油醚‑乙酸乙酯溶剂洗脱，洗脱剂用量为2～4BV，流速为0.5～1.5BV/h，弃去洗脱液，再以体积比为10:1的石油醚‑乙酸乙酯溶剂洗脱，洗脱剂用量为7～9BV，流速为1～3BV/h，收集洗脱液，再以体积比为5:1的石油醚‑乙酸乙酯溶剂洗脱，洗脱剂用量为7～9BV，流速为1～3BV/h，收集洗脱液，将收集到的洗脱液合并，浓缩，得浸膏C；

(4)取步骤(3)所得的浸膏C，上LH‑20型凝胶柱色谱，色谱柱的径高比为1:9～11，上样体积为7～9BV，以体积比为1:1的二氯甲烷‑甲醇溶液为洗脱剂，洗脱剂用量为9～11BV，流速为0.5～1.5BV/h，洗脱收集洗脱液，浓缩，得浸膏D；

(5)取步骤(4)所得的浸膏D，加入15～25倍量的水，滤过，滤液用盐酸水溶液调pH值至5～7，加活性炭适量，滤过，滤液加注射用水稀释，再次滤过，加聚山梨酯80，搅匀，调pH值至5～6调pH值至5～6，用微孔滤膜滤过，滤液分装，灌封，灭菌，即得；

其特征在于，采用超高效液相色谱法测定芳樟醇乙酸酯、愈创木脂素的含量，其步骤如下：

(1)色谱条件：色谱柱：PR8，流动相：体积比为30～40：60～70的乙腈‑0.5％冰醋酸水溶液；流速：1.0～2.0mL·min^‑1；检测波长：320～330nm；柱温：35～40℃；进样量：1～10μL；

(2)对照品溶液的制备：精密称定芳樟醇乙酸酯钠对照品8.00～12.00mg，愈创木脂素对照品3.00～7.00mg置10mL容量瓶中，加体积比为30～40：60～70的乙腈‑0.5％冰醋酸水溶液定容至刻度，摇匀，即得；

(3)供试品溶液的制备：取肿节风注射液，用0.22μm膜滤过，即得；

(4)测定：精密吸取对