[发明专利]一种猪繁殖与呼吸综合征病毒纯化方法

摘要

本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒纯化方法，该方法包括病毒离心初步纯化、PEG6000沉淀法二级纯化、和透析袋透析纯化等步骤。该方法对PEG6000的浓度，沉淀时间，离心力进行优化，最大限度地提高病毒的回收率，以该方法纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒可以满足基本的实验室研究以及疫苗制备需求，相较于现有技术，以本发明制备的产品具有病毒滴度高，完整性好，背景清晰的优点，加之工艺简便，成本较低，因此有很好的推广前景。

主权项

1.一种猪繁殖与呼吸综合征病毒纯化方法，其特征在于使用PEG6000沉淀法与透析袋，并包括以下步骤：1)将在Marc‑145细胞中培养的病毒冻融三次，使细胞裂解，将病毒释放入培养液中；2)将该病毒液初步离心，除去细胞碎片及部分杂质，获得初级纯化病毒液；3)以1∶1的比例将PEG6000/NaCl混合液加入到步骤2)的初级纯化病毒液中，使用混合仪混匀震荡一定时间；4)将步骤3)混匀后的病毒液放入低温离心机中离心，离心后弃上清，沉淀加入无菌0.1M的PBS，震荡重悬；5)将步骤4)中的病毒重悬液再次放入冷冻离心机，离心除去沉淀，取上清，获得二级纯化病毒液；6)将步骤5)中的二级纯化病毒液滴加入透析袋，将透析袋放置于透析液中，用磁力搅拌器透析一定时间，每隔两个小时换一次透析液，最终获得病毒纯化液成品。