[发明专利]一种抗牛早孕因子单克隆抗体细胞株单克隆抗体的制备方法在审
| 申请号： | 201810036346.5 | 申请日： | 2018-01-15 |
| 公开（公告）号： | CN108314732A | 公开（公告）日： | 2018-07-24 |
| 发明（设计）人： | 陆建;郑庆丰;信维力 | 申请（专利权）人： | 妊达（北京）生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C07K16/18 | 分类号： | C07K16/18;C07K1/22;C12N5/20;G01N33/68;G01N33/577;C12R1/91 |
| 代理公司： | 北京纽乐康知识产权代理事务所(普通合伙) 11210 | 代理人： | 史静 |
| 地址： | 100096 北京市昌平区回龙*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种抗牛早孕因子单克隆抗体细胞株单克隆抗体的制备方法，包括以下步骤：合成抗体位点序列多肽，并偶联载体蛋白，采用B细胞杂交瘤技术建立一种抗牛早孕因子单克隆抗体细胞株，偶联产物免疫的BALB/C小鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合，经阳性杂交瘤细胞筛选、细胞克隆获得能稳定传代并分泌抗牛早孕单克隆抗体的杂交瘤细胞；用构建的杂交瘤细胞对BALB/C小鼠进行腹腔注射，制备腹水单克隆抗体。本发明提供的抗牛早孕因子单克隆抗体细胞株及抗牛早孕因子单克隆抗体，为牛早期妊娠的快速检测提供服务。 | ||
| 搜索关键词： | 早孕因子 单克隆抗体细胞株 单克隆抗体 制备 杂交瘤细胞 腹水单克隆抗体 阳性杂交瘤细胞 传代 偶联载体蛋白 鼠骨髓瘤细胞 杂交瘤技术 腹腔注射 合成抗体 快速检测 偶联产物 位点序列 细胞克隆 早期妊娠 脾细胞 多肽 构建 早孕 分泌 筛选 融合 服务 | ||
【主权项】：
1.一种抗牛早孕因子单克隆抗体细胞株单克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1建立抗牛早孕因子单克隆抗体细胞株：通过表位预测获得抗原表位免疫多肽，与载体KLH交联，免疫小鼠获得抗血清并测定效价，SP2/0细胞与小鼠脾细胞融合，细胞克隆获得能稳定传代并分泌抗牛早孕单克隆抗体的杂交瘤细胞，筛选阳性克隆；S2制备单克隆抗体：收集S1建立的抗牛早孕因子单克隆抗体细胞株阳性克隆，对小鼠进行腹腔注射，收集腹水，去细胞、除杂，澄清处理，应用Protein G层析柱对单克隆抗体进行亲和纯化。
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