[发明专利]一种广西金花茶多糖肽的制备方法

摘要

本发明属于生物提取技术领域，具体涉及一种广西金花茶多糖肽的制备方法。本发明提供的广西金花茶多糖肽的制备方法包括脱脂预处理、提取、醇沉、纯化步骤，本发明广西金花茶多糖肽的制备工艺合理，多糖肽提取效率高，纯度高达86.3％，另外，制备的多糖肽抗氧化活性良好，对羟自由基的清除率达到73％，对超氧阴离子自由基的清除率达到81％，为金花茶作为抗氧化、抗衰老保健食品的开发提供理论依据。

主权项

一种广西金花茶多糖肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、脱脂：金花茶叶片清洗后粉碎，过10‑20目筛，得金花茶粉末，取上述所得金花茶粉末10g，加入二氯甲烷和乙醇，二氯甲烷和乙醇体积比为2‑5:1‑3，60‑80℃回流2‑3h，得脱脂金花茶；S2、提取：向步骤S1所得脱脂金花茶中加入蒸馏水和纤维素酶，用质量浓度为5‑10％的柠檬酸溶液调节pH值至5.5，40‑60℃酶解0.5‑1h，高温灭酶，脉冲电场处理后超声提取0.5‑2h，3层200目纱布过滤，收集滤液，滤渣加入蒸馏水后同法操作再提取一次，合并滤液，浓缩，得多糖肽溶液；S3、醇沉：将步骤S2所得多糖肽溶液在不断搅拌中缓慢滴加无水乙醇，磁力搅拌20‑40min后于2‑5℃静置16‑24h，10000‑15000r/min高速离心，收集乙醇沉淀部分I，离心后的上清液再缓慢滴加无水乙醇，同法操作，收集乙醇沉淀部分II，合并两次收集到的沉淀部分，真空低温干燥，得多糖肽粗品；S4、纯化：将步骤S3所得多糖肽粗品加蒸馏水微热溶解，离心除去不溶性杂质，通过聚丙烯酰胺凝胶柱层析，用含5‑10mol/L NaCl的Na2HPO4‑NaH2PO4缓冲液洗脱，蒸馏水透析10‑20h，取袋内液进行浓缩，加入5倍体积的无水乙醇沉淀，离心，收集沉淀部分，冷冻干燥，即得。