[发明专利]一种微波合成SF-Cd缓释微球的制备方法

摘要

本发明涉及一种微波合成SF‑Cd缓释微球的制备方法。本发明利用低温脱气处理、降解和纯化分离制得丝素蛋白，并以素蛋白为改性对象，通过微波湿法美拉德反应分别接枝四种糖类物质并筛选，其中环糊精(Cd)的接枝率最高，制得丝素蛋白糖基化接枝产物。本申请的发明人探索不同反应因素对丝素蛋白游离氨基酸含量及褐变程度的影响，同时采用多种表征手段对比了微波加热和水浴加热对SF‑Cd共价复合物的物化性质及结构功能等方面的影响。最后以左旋香芹酮(Left‑Carvon，L‑Ca)为缓释模型物，对丝素蛋白糖基化微球进行口腔模拟缓释性能测试，测定缓释效果。

主权项

1.一种SF‑Cd缓释微球的制备方法，包括如下步骤：1)低温脱胶将生蚕茧中的杂质去除并剪碎后，称取一定质量的蚕丝碎片，加入去离子水和无水碳酸钠；使蚕丝完全被溶液浸没，搅拌均匀后密封充入氮气，使之隔绝空气进行脱胶处理，置于37‑38℃恒温槽中加入转子匀速搅拌反应；每隔24h取出并过滤，用25％碳酸钠溶液清洗滤出物后，加入等体积的25％碳酸钠溶液继续搅拌反应，每隔24h更换溶液，留取脱胶滤液；2)脱胶丝素的降解称取部分冻干后的蚕丝，按照体积质量比丝素蛋白(g)：溶剂(mL)＝1：70加入溶解丝素蛋白的溶剂；搅拌均匀后密封充入氮气，使之隔绝空气进行降解，置于37‑38℃恒温槽中加入转子匀速搅拌反应，三天后取出，在6000r/min条件下低温冷冻离心30min，取上清液；3)中分子量活性丝素蛋白的分离纯化将截留分子量分别为20kD和50kD的透析袋叠加，50kD在内，20kD在外，把上清液倒入50kD透析袋内，在去离子水中透析48h，每隔12h进行换水操作，透析结束后将透析袋间的样品进行冷冻干燥，获得丝素蛋白粉；4)多糖的筛选及SF‑Cd缓释微球的制备称取一定质量的丝素蛋白置于烧杯中，再倒入一定量的去离子水，pH值调节至7，配成蛋白含量为10％的溶液。加入多糖，其中质量比为丝素蛋白：多糖＝2.5：1，制备出蛋白多糖混合溶液；制备过程中用磁力搅拌装置不停搅拌直至均匀，然后冷冻干燥备用；将上述粉末，研磨均匀后过150目筛，取等量筛出物置于双频超声微波组合催化合成仪中，调节微波功率为500w、超声功率为300w、反应时间为4min，反应后取出，冰水浴1分钟结束反应，即得到混合产物；配制浓度比的蛋白多糖粉末，以同样方法处理并置于双频超声微波组合催化合成仪中反应，调节微波功率100w‑500w和超声功率100w‑300w，反应一段时间后取出，冰水浴1分钟结束反应，即得到SF‑Cd混合产物。