[发明专利]一种高浓缩生长因子的应用

摘要

本发明涉及高浓缩生长因子技术领域，且公开了一种高浓缩生长因子及其应用，包括高浓度血小板血浆和脂肪干细胞来源，包括以下步骤：1)高浓度血小板血浆提取生长因子的步骤如下：(A)通过静脉抽血或者其他方法从自体身上取出30‑60ml体积的血液，放置在柠檬酸钠血液收集管中或其他便于运输的容器内，使血液和抗凝剂充分混匀,(B)使混有抗凝剂的血液置于离心管中，进行第一次离心，采用300g的离心速度，时间为5min，使血液基本上分成三层。该高浓缩生长因子及其应用，使用一种新的方法从自体中获得的高浓度血小板血浆和脂肪干细胞来源中提取出可以应用在美容护理领域内的无包裹和高浓缩生长因子，这种提取技术成本更低廉以及效果更好。

主权项

1.一种高浓缩生长因子及其应用，包括高浓度血小板血浆和脂肪干细胞来源，其特征在于，包括以下步骤：1)高浓度血小板血浆提取生长因子的步骤如下：(A)通过静脉抽血或者其他方法从自体身上取出30-60ml体积的血液，放置在柠檬酸钠血液收集管中或其他便于运输的容器内，使血液和抗凝剂充分混匀；(B)使混有抗凝剂的血液置于离心管中，进行第一次离心，采用300g的离心速度，时间为5min，使血液基本上分成三层；(C)然后将收集的血浆同白细胞层混合均匀，进行第二次离心，采用700g的离心速度，时间为17min；(D)弃掉离心管80％左右的上层血浆，利用剩余的血浆使沉淀的血小板重新悬浮，收集到容器中即得血小板血浆，而生长因子就高度富集于分离好的高浓度血小板血浆中；(E)从稳定的高浓度血小板血浆中释放生长因子，采取虹吸法过滤释放的生长因子；(F)将已释放的生长因子保存在-80℃的冷藏环境中；其中步骤(D)中，步骤(D)所得血小板血浆中血小板的浓度是分离前全血中血小板浓度的8～10倍。2)脂肪干细胞来源提取生长因子的步骤如下：(A)通过抽脂或微创手术抽取60-200ml体积的脂肪，加入运输液送到实验室；(B)脂肪间质血管层(SVF)将通过2-3次预热的等体积(乳酸钠溶液：脂肪组织＝1：1)的乳酸钠溶液清洗(第一次用含有2％抗生素浓度的乳酸钠溶液清洗，第2-3次用纯净的乳酸钠溶液清洗)后获得；用预热的含有2％抗生素的等体积乳酸钠溶液清洗抽取的脂肪组织，大力地用手晃动(或用600振幅/分钟的振动筛)含有脂肪组织及清洗液的容器1-2分钟后，将悬浮的混合物静止10分钟或用300g的速度离心5分钟，然后弃掉乳酸钠溶液层；再使用纯净的乳酸钠溶液清洗脂肪组织1-2次，尽可能的吸掉残留的红细胞，最终都弃掉清洗液保留脂肪组织层；在清洗过的脂肪组织中加入等体积的浓度为1mg/ml的胶原酶溶液在37度、180RPM的振动筛上消化分解60分钟；将消化好的脂肪组织以600-800g的速度离心10分钟，消化后的脂肪组织将被分为三层：油质/脂肪细胞层，清夜层以及最下层沉淀；(C)向所述脂肪干细胞来源施加选自低氧培养、UV照射、营养缺乏和机械摩擦中的至少一种物理刺激，稳定高浓度血小板血浆内的生物结构；(D)从稳定后的脂肪间质血管层(SVF)中释放生长因子，用100μm的过滤筛过滤掉组织碎片；(E)将已释放的生长因子保存在-80℃的冷藏环境中。对现有产品的进一步研发中，释放生长因子这一过程将通过反复冻融这一过程来完成，高浓度血小板血浆或脂肪间质血管层在零下55摄氏度的环境下至少冷冻30分钟，然后在37摄氏度的条件下复融10分钟，释放的生长因子通过醋酸纤维素薄膜过滤后储存在零下80摄氏度的环境中，通过这一操作过程，高浓缩生长因子将可以保存长至几年的时间。