[发明专利]一种基于拟多级谱进行完整糖基化肽段的质谱检测方法有效
| 申请号： | 201711339389.2 | 申请日： | 2017-12-14 |
| 公开（公告）号： | CN109959699B | 公开（公告）日： | 2021-08-03 |
| 发明（设计）人： | 叶明亮;秦洪强;陈尧;王璐 | 申请（专利权）人： | 中国科学院大连化学物理研究所 |
| 主分类号： | G01N30/08 | 分类号： | G01N30/08;G01N30/88 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 马驰 |
| 地址： | 116023 *** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种基于拟多级谱进行完整糖基化肽段的质谱检测方法，及其在肝癌的早期诊断中的应用。该发明主要包括以下五个步骤：1)糖基化肽段的富集；2)去糖基化肽段‑完整糖基化肽段的样品制备；3)去糖基化肽段‑完整糖基化肽段的质谱检测；4)去糖基化肽段‑完整糖基化肽段的谱图数据检索；5)在此基础上，结合糖基化位点、完整糖肽定量技术，实现肿瘤患者与正常人的糖基化精细差异分析，筛选潜在的疾病标记物。本方法实现了人源蛋白质糖基化的精细解析，在肿瘤标志物的筛选方面具有重要的应用潜力。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 多级 进行 完整 糖基化肽段 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一种基于拟多级谱进行完整糖基化肽段的质谱检测方法，其特征在于：(1)去糖基化肽段‑完整糖基化肽段的样品制备，利用亲水作用色谱富集蛋白样品酶解物中的糖基化肽段，将富集的糖基化肽段分作两份，取其中一份采用糖苷酶进行糖基化肽段的糖链简化处理，并将糖苷酶处理的去糖基化肽段与糖基化肽段混合，进行二者的同时检测；(2)去糖基化肽段‑完整糖基化肽段的同时质谱检测，主要是利用质谱的不同碎裂能量(包含并不局限于台阶能量碎裂模式)，实现去糖基化肽段‑完整糖基化肽段的同时高效碎裂；(3)去糖基化肽段‑完整糖基化肽段的谱图数据检索，利用完整糖肽碎裂产生的特征碎裂，进行糖链结构的确认，并结合相应的去糖基化肽段，确认完整糖肽的肽段骨架序列信息和糖链结构。
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