[发明专利]一种检测人类EGFR 基因T790M 和L858R 突变的方法和试剂盒

摘要

本发明提供一种用于人类EGFR基因T790M和L858R双重突变的数字PCR检测体系的引物和探针组合，一种用于人类EGFR基因T790M和L858R双重突变的数字PCR检测体系，一种人类EGFR基因T790M和L858R双重突变的数字PCR检测试剂盒，以及一种人类EGFR基因T790M和L858R双重突变的数字PCR的检测方法。在双重体系中通过digital PCR平台的方法，实现同时对于T790M和L858R的高灵敏度检测，降低成本，减少样本的消耗，尤其对于样本比较稀缺的ctDNA，也方便肿瘤组织等其他样本类型的检测，为非小细胞肺癌的患者提供一定的用药指导。

主权项

1.一种用于人类EGFR基因T790M和L858R双重突变的数字PCR检测体系的引物和探针组合，所述引物和探针组合包括：用于T790M的引物和探针组合和用于L858R的引物和探针组合，其中，所述用于T790M的引物和探针组合为：T790M上游引物：5’‑GCCTGCTGGGCATCTG‑3’(SEQ ID NO.1)T790M下游引物：5’‑TTTGTGTTCCCGGACATAGTC‑3’(SEQ ID NO.2)T790M突变型探针：5’‑FAM‑TGAGCTGCATGATGA‑MGB‑NFQ‑3’(SEQ ID NO.3)T790M野生型探针：5’‑VIC‑TGAGCTGCGTGATGA‑MGB‑NFQ‑3’(SEQ ID NO.4)，其中，用于L858R的引物和探针组合为：L858R上游引物：5’‑CGCAGCATGTCAAGATCACAGAT‑3’(SEQ ID NO.5)L858R下游引物：5’‑CTCCTTCTGCATGGTATTCTTTCTC‑3’(SEQ ID NO.6)L858R突变型探针：5’–FAM‑AGTTTGGCCCGCCCAA‑MGB‑NFQ‑3’(SEQ ID NO.7)L858R野生型探针：5’‑VIC‑AGTTTGGCCAGCCCAA‑MGB‑NFQ‑3’(SEQ ID NO.8)。