[发明专利]一种相对定量分析肉鸡谷胱甘肽S转移酶GSTA2的方法有效
| 申请号： | 201711237702.1 | 申请日： | 2017-11-30 |
| 公开（公告）号： | CN108169397B | 公开（公告）日： | 2019-11-15 |
| 发明（设计）人： | 高杰;孟庆石;姬生跃;夏冰;张宏福;唐湘方 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | G01N30/88 | 分类号： | G01N30/88 |
| 代理公司： | 11403 北京风雅颂专利代理有限公司 | 代理人： | 张拥<国际申请>=<国际公布>=<进入国 |
| 地址： | 100019北京市海淀区圆明*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种相对定量分析肉鸡谷胱甘肽S转移酶GSTA2的方法，先进行肉鸡谷胱甘肽S转移酶GSTA2的提取，再对肉鸡谷胱甘肽S转移酶GSTA2进行酶切获得特异性肽段，然后使用液质联用仪检测特异性肽段的子母离子对，获得特异性肽段的子离子信号强度总和，根据特异肽段的子离子信号强度总和获得GSTA2蛋白的信号强度，通过比较不同处理肉鸡样品中GSTA2蛋白的信号强度，从而实现对不同处理肉鸡样品中GSTA2蛋白的相对定量；肉鸡谷胱甘肽S转移酶GSTA2的特异性肽段为3条，其氨基酸序列分别为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示。本发明的方法相对于基于抗体Western Blot法特异性更强，并且免去了制备抗体的繁琐步骤，提高了鸡源GSTA2蛋白检测通量和效率。 | ||
| 搜索关键词： | 肉鸡 谷胱甘肽S转移酶 特异性肽 定量分析 蛋白 子离子 抗体 氨基酸序列 蛋白检测 繁琐步骤 相对定量 联用仪 使用液 鸡源 酶切 通量 制备 子母 肽段 离子 检测 | ||
【主权项】：
1.一种相对定量分析肉鸡谷胱甘肽S转移酶GSTA2的方法，其特征在于，先进行肉鸡谷胱甘肽S转移酶GSTA2的提取，再对肉鸡谷胱甘肽S转移酶GSTA2进行酶切获得特异性肽段，然后使用液质联用仪检测特异性肽段的子母离子对，获得特异性肽段的子离子信号强度总和，根据特异肽段的子离子信号强度总和获得肉鸡谷胱甘肽S转移酶GSTA2的信号强度，通过比较不同处理肉鸡样品中肉鸡谷胱甘肽S转移酶GSTA2的信号强度，从而实现对不同处理肉鸡样品中肉鸡谷胱甘肽S转移酶GSTA2的相对定量；/n所述肉鸡谷胱甘肽S转移酶GSTA2的特异性肽段为3条，3条特异性肽段的氨基酸序列分别为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示；/n其中，SEQ ID NO:1：Ala-Ile-Leu-Cys-[Cys-Ala-Met]-Tyr-Leu-Ala-Gly-Lys；/nSEQ ID NO:2：Asn-Ile-Ala-Leu-Ile-Thr-Glu-Arg；/nSEQ ID NO:3：Ser-Asp-Ile-Leu-Ser-Ala-Phe-Pro-Leu-Leu-Gln-Ala-Phe-Lys。/n
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