[发明专利]一种HSCCC-DPPH联用在线活性分析及分离麦冬高异黄酮的方法

摘要

本发明涉及一种HSCCC‑DPPH联用在线活性分析及分离麦冬高异黄酮的方法，其包括以下步骤：1）样品准备；2）HSCCC流动相与固定相准备；3）DPPH流动相溶液准备；4）HSCCC‑DPPH系统的平衡与连接；5）样品的分析及分离。上述的一种HSCCC‑DPPH联用在线活性分析及分离麦冬高异黄酮的方法，设计合理，通过该方法能够实现对麦冬（包括块根、须根等不同植物部分）中清除DPPH活性成分的高异黄酮在线检测分析及分离。

主权项

一种HSCCC‑DPPH联用在线活性分析及分离麦冬高异黄酮的方法，其特征在于包括以下步骤：1）样品准备取麦冬的粗提物或乙酸乙酯萃取物或经初步分离的化学部位，用旋转蒸发仪蒸干除去溶剂，得到浓缩后的样品，备用；2）HSCCC流动相与固定相准备选择合适HSCCC两相溶剂体系，按体积比及先后顺序将溶剂加入分液漏斗，振摇，使溶剂混匀，静置过夜上相为流动相，下相为固定相，超声脱气20min，静置至室温，备用；3）DPPH流动相溶液准备精密称取DPPH，用色谱甲醇定容于容量瓶，摇匀溶解，用微孔滤膜过滤，滤液装入棕色瓶，超声脱气15min，静置至室温，备用；4）HSCCC‑DPPH系统的平衡与连接以10～20mL/min 的流速往HSCCC仪中泵入固定相，待管路完全充满固定相后以600～1000rpm转动主机，同时以1～3mL/min 的速度泵入流动相，至HSCCC系统平衡；应用输液泵入DPPH溶液至检测器基线平衡；用连接管连接HSCCC和输液泵，HSCCC流动相经检测器1流出后，与输液泵入DPPH溶液在线混合，再进入检测器2分析，直至HSCCC和DPPH各自所对应的检测器基线平衡，所用设备为的高速逆流色谱仪、输液泵和2台紫外‑可见光谱分析检测系统的联用设备；5）样品的分析及分离将样品用高速逆流色谱选用溶剂系统溶解，滤膜过滤，通过HSCCC主机进样系统进样，通过2台检测器监测可以实现对麦冬活性成分的在线分析；如果需要分离获得相对应的活性成分，则断开HSCCC‑DPPH连接，再次进样后根据HSCCC图谱收集相应峰位置流动相，蒸干即得；或者在HSCCC流动相进入检测器之前连接一个可调节分液器，一部分液体进入HSCCC检测器分析而后与输液泵入的DPPH溶液混后进入液相检测器，另一部分可以同步收集流动相，实现活性成分的同步分析与分离。