[发明专利]一种小分子量的丝素肽的分离方法在审
申请号: | 201711223637.7 | 申请日: | 2017-11-29 |
公开(公告)号: | CN107722116A | 公开(公告)日: | 2018-02-23 |
发明(设计)人: | 王建南;张玲;裔洪根 | 申请(专利权)人: | 苏州大学 |
主分类号: | C07K14/435 | 分类号: | C07K14/435;C07K1/14;C07K1/16 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司11227 | 代理人: | 常亮 |
地址: | 215137 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明提供了一种小分子量的丝素肽的分离方法,包括将家蚕蚕丝脱胶、溶解,得到溶解液;将溶解液加入葡聚糖G10柱中,用灭菌水洗脱,收集得到脱盐的丝素蛋白水溶液;将脱盐的丝素蛋白水溶液冻干,得到冻干后的丝素蛋白;将冻干的丝素蛋白溶解液加入葡聚糖G50柱中,用灭菌水洗脱丝素蛋白,分管收集;筛选步骤d)收集管中1500Da以下的丝素肽,再次加入葡聚糖G15柱中,用灭菌水洗脱丝素肽,分管收集,分离得到1500Da以下的各级小分子量丝素肽。通过本发明的中性盐溶解结合不同分子筛柱的梯度分离,得到1500Da以下多级别的小分子量丝素肽。同时通过特定的冻干‑溶解的方法使得丝素肽亲水性更好。 | ||
搜索关键词: | 一种 分子量 丝素 分离 方法 | ||
【主权项】:
一种小分子量的丝素肽的分离方法,其特征在于,包括:a)将家蚕蚕丝脱胶、加入中性盐溶液溶解,得到丝素蛋白溶解液;b)将丝素蛋白溶解液加入平衡后的葡聚糖Sephadex G10柱中,用灭菌水洗脱丝素蛋白,收集流出液,得到脱盐的丝素蛋白水溶液;c)将脱盐的丝素蛋白水溶液冻干,得到冻干后的丝素蛋白;d)将冻干的丝素蛋白溶解液加入平衡后的葡聚糖Sephadex G50柱中,用灭菌水洗脱丝素蛋白,分管收集;e)采用SDS‑PAGE电泳或质谱筛选步骤d)收集管中1500Da以下的丝素肽,再次加入平衡后的葡聚糖Sephadex G15柱中,用灭菌水洗脱丝素肽,分管收集,分离得1500Da以下的各级小分子量丝素肽。
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