[发明专利]一种E型产气荚膜梭菌类毒素疫苗的制备方法有效
申请号: | 201711076893.8 | 申请日: | 2017-11-06 |
公开(公告)号: | CN107875377B | 公开(公告)日: | 2020-01-03 |
发明(设计)人: | 柴同杰;马连营;郭梦娇;蔡玉梅 | 申请(专利权)人: | 山东农业大学 |
主分类号: | A61K39/08 | 分类号: | A61K39/08;A61K39/39;A61P31/04;A61P1/12 |
代理公司: | 37240 济南誉丰专利代理事务所(普通合伙企业) | 代理人: | 李茜 |
地址: | 271000 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种E型产气荚膜梭菌类毒素疫苗的制备方法,包括如下步骤:(1)将E型产气荚膜梭菌菌种接种于无菌血平皿培养基上,厌氧培养,进行菌株的复苏;(2)将复苏后的E型产气荚膜梭菌菌种接种于液体硫乙醇酸盐流体培养基中,厌氧条件下进行増菌,制得种子液;(3)将种子液接种于产毒培养基中,厌氧培养,制备得到外毒素液;(4)将制备的外毒素液经灭活、乳化处理,再加入硫柳汞,即制备得到E型产气荚膜梭菌类毒素疫苗。本发明开发制备了免疫力强,无毒副作用的E型产气荚膜梭菌类毒素疫苗。该疫苗可以有效预防由此菌导致的犊牛,羔羊痢疾等疾病。 | ||
搜索关键词: | 一种 型产气 荚膜 菌类 毒素 疫苗 制备 方法 | ||
【主权项】:
1.一种E型产气荚膜梭菌类毒素疫苗的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:/n(1)将E型产气荚膜梭菌菌种接种于无菌血平皿培养基上,厌氧培养,进行菌株的复苏;/n(2)将复苏后的E型产气荚膜梭菌菌种接种于液体硫乙醇酸盐流体培养基中,厌氧条件下进行増菌,制得种子液;/n(3)将种子液接种于产毒培养基中,厌氧培养,过滤除菌,制备得到外毒素液;/n(4)将制备的外毒素液经灭活、乳化处理,再加入硫柳汞,即制备得到E型产气荚膜梭菌类毒素疫苗;/n步骤(1)中,所述无菌血平皿培养基由如下方法制备而成:/n将3.8g血琼脂基础,1g葡萄糖,溶于100mL的去离子水中,121℃,15min高压灭菌,冷却至50℃,加入5mL脱纤维绵羊血,摇晃均匀,倾入灭菌的平皿,即得;/n步骤(3)中,所述产毒培养基由如下方法制备而成:/n2g蛋白胨,1g糊精,2g酵母提取物,1.2g L-精氨酸溶于100mL PBS缓冲液,用浓盐酸调pH为7.5,高压灭菌,即得;/n厌氧培养时,厌氧条件的气体构成按体积分数为:88%N
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