[发明专利]一种珍珠活力成分的鉴定

摘要

本发明公开了一种珍珠活力成分的鉴定，鉴定的具体步骤为：将珍珠水解得水溶性珍珠蛋白，然后将沉淀物酸解得酸溶性珍珠蛋白，离心沉淀物冷冻干燥得角壳蛋白；将角壳蛋白用肽N‑糖苷酶F酶解；采用分离胶对珍珠蛋白进行电泳，电泳后凝胶染色，脱色，扫描图谱并分析；将显色后的蛋白凝胶割下，处理后用胰蛋白酶酶解，用液相色谱分离提取出肽段；将肽段进行质谱检测，获取质谱图，测出分子量和电荷比m/z，然后利用质谱得到的m/z数值进行数据库比对。有益效果为：本发明得到的珍珠总蛋白成分齐全，减少了蛋白质样品水解，能快速、高效、准确地鉴定珍珠活力成份，为珍珠蛋白的进一步深入研究和综合开发提供理论依据。

主权项

1.一种珍珠活力成分的鉴定，其特征在于：所述鉴定的具体步骤为：1）将珍珠用次氯酸溶液清理，洗净，晾干，磨粉，过筛，加入去离子水水解，离心，上清液透析得水溶性珍珠蛋白，然后将离心沉淀物中加入冰醋酸溶液酸解，离心，上清液透析得酸溶性珍珠蛋白，离心沉淀物冷冻干燥得角壳蛋白；2）将角壳蛋白溶于尿素或盐酸胍溶液中，用二硫苏糖醇预处理后再于暗室中用碘乙酰胺处理，透析，酶解，分离，纯化，洗脱，得预处理后角壳蛋白，备用；3）采用分离胶对珍珠蛋白进行SDS-PAGE电泳，电泳后凝胶染色，然后脱色至背景清晰，最后扫描图谱并分析条；4）将显色后的蛋白凝胶割下，清洗干净，晾干，用二硫苏糖醇预处理后再于暗室中用碘乙酰胺处理，取出后放入胰蛋白酶溶液中，低温处理后去除多余酶液后，然后加入碳酸氢铵，酶解，再加入甲酸停止反应，最后用液相色谱分离提取出肽段，备用；5）将肽段进行质谱检测，获取质谱图，测出分子量和电荷比m/z，然后利用质谱得到的m/z数值进行数据库比对。