[发明专利]采用HPLC-UV-ELSD法检测复方丹参片的方法

摘要

本发明公开了一种采用HPLC‑UV‑ELSD法检测复方丹参片的方法，采用液相色谱梯度洗脱、切换检测波长和紫外检测器串联蒸发光散射检测器的检测方法，对复方丹参片中丹参与三七的特征图谱进行研究。本发明能够对复方丹参片进行全信息的控制，简化了检验过程，节约了分析时间，可用于复方丹参片质量控制及综合评价。

主权项

1.采用HPLC-UV-ELSD法检测复方丹参片的方法，其特征在于，所述方法包括以下内容：（1）色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1%三氟乙酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱，洗脱时间95分钟；设定0～71分钟检测波长为280nm，71～96分钟检测波长为270nm，皂苷用蒸发光散射检测器检测；（2）对照品溶液的制备：取丹参素钠对照品适量，精密称定，加水制成每1mL含100μg的溶液，另取原儿茶醛对照品、迷迭香酸对照品、丹酚酸B对照品、二氢丹参酮Ⅰ对照品、隐丹参酮对照品、丹参酮Ⅰ对照品、丹参酮ⅡA对照品、三七皂苷R1对照品、人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Rd对照品适量，加甲醇制成每1mL含原儿茶醛、迷迭香酸、二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA各20μg，丹酚酸B、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd 各50μg的混合溶液；（3）供试品溶液的制备：取样品10片，除去包衣，精密称定，研细，取约0.9g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇25mL，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；（4）耐用性考察：1）不同色谱柱的考察：在同一台Waters高效液相色谱仪，分别使用不同的色谱柱进行检测；2）不同仪器的考察：用同一柱子分别在不同品牌仪器上进行检测；（5）检测：分别精密吸取上述对照品溶液和供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定；（6）方法学验证：分别进行稳定性、精密度、重复性和专属性试验。