[发明专利]一种利用自然光培养一步成苗高效繁殖金线莲的方法

摘要

本发明公开了一种利用自然光培养一步成苗高效繁殖金线莲的方法，是以金线莲人工授粉获得的蒴果为外植体材料，无菌播种到一步成苗培养基上，利用自然光诱导种子萌发直接分化生长成完整植株。该方法中人工授粉成功率高达80%，从播种到组培苗出瓶移栽只需180d，期间不需人工转接；且培养出的组培苗粗壮、抗性好，不需专门的炼苗就可直接移栽，移栽成活率高达90%以上。该方法操作简便，能显著缩短培养周期和降低金线莲组培苗生产成本，便于大规模工厂化生产应用，且一步成苗培养基配方中仅使用天然有机添加物和低浓度的植物生长调节剂，有利于保持种源的优良性状，提高种苗使用的安全性，对珍稀濒危药用植物资源再生和可持续利用具有十分积极的影响。

主权项

一种利用自然光培养一步成苗高效繁殖金线莲的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）建造全自然光培养室：建造铝合金框架玻璃墙顶房屋式全自然光培养室，屋顶和四周安装有遮阳降温设施，全自然光培养室与组培接种实验室由专用通道相通，培养室内部摆放培养架；（2）收集金线莲种源并进行人工授粉：通过野外采集获得金线莲种质资源，引种到种质圃内进行种植保存，待花朵开放后，在上午8~10点，选取开放1~3d的花朵，取其蕊柱上呈浅黄色、具有黏性的花粉块置于亲本花的柱头蕊腔内，授粉方式为居群内自花、异花或异株授粉，24h内停止浇水并挂牌标记；（3）灭菌消毒：采摘人工授粉后生长60~90d的金线莲蒴果，到自来水下用软毛刷洗去表面灰尘和脏物，然后移至超净工作台内进行无菌操作，先放入75%酒精中浸泡30s后，转入0.1% HgCl2 溶液中消毒10 min，期间不断摇动，无菌水漂洗5遍，用无菌滤纸吸干材料表面水分；（4）一步成苗培养：将经外表灭菌消毒处理后的蒴果纵向剖开，将里面细小的种子取出，均匀稀疏地播种到一步成苗培养基上，置于温度25~28℃的黑暗条件下培养1d，然后转移到全自然光培养室中的培养架上，保持温度23~27℃条件下培养30d，种子萌发形成原球茎，再分化生长为小苗，之后长出根系，培养180 d后形成完整植株；（5）出瓶移栽：经过成苗培养的健壮大苗，待根系生长发达后，在移栽季节，进行出瓶移栽。