[发明专利]基于点击化学的测序接头、双条形码测序文库及其构建方法有效
| 申请号： | 201710994066.0 | 申请日： | 2017-10-23 |
| 公开（公告）号： | CN109694864B | 公开（公告）日： | 2020-12-25 |
| 发明（设计）人： | 吴红龙;萧卓;刘华勇;宫艳萍;袁剑颖 | 申请（专利权）人： | 深圳华大因源医药科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/10;C40B80/00;C40B50/06 |
| 代理公司： | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 | 代理人： | 孙银行;彭家恩 |
| 地址： | 518057 广东省深圳市南山区粤海街道高新区社区*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 一种基于点击化学的测序接头、双条形码测序文库及其构建方法，该测序接头包括：日期片段，包括5’端的与正向引物部分或全部序列一致的序列、中间的日期条形码序列以及3’末端的点击化学反应基团；样本片段顶链，包括5’末端的点击化学反应基团、中间的样本条形码序列以及3’端的与反向引物部分或全部序列一致的序列；样本片段底链，包括5’末端的磷酸化修饰、中间的样本条形码序列；其中样本片段底链分别与日期片段和样本片段顶链部分杂交；杂交后日期片段的点击化学反应基团与样本片段顶链的点击化学反应基团位置接近且能发生点击化学反应而偶联。可以快速、高效地实现双条形码测序文库构建，通过测序推断出核酸文库构建的日期，实现准确的样本溯源。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 点击 化学 接头 条形码 序文 及其 构建 方法 | ||
【主权项】：
1.一种基于点击化学的测序接头，其特征在于，所述的测序接头包括如下三条核酸序列片段：日期片段，其包括5’端的与正向引物部分或全部序列一致的序列、中间的用于编码日期信息的条形码序列以及3’末端的用于进行点击化学反应的基团；样本片段顶链，其包括5’末端的与所述日期片段的3’末端基团进行点击化学反应的基团、中间的用于区分样本的条形码序列以及靠近3’端的与反向引物部分或全部序列一致的序列；样本片段底链，其包括5’末端的用于与待测序核酸片段连接的磷酸化修饰、中间的用于区分样本的条形码序列，该条形码序列与所述样本片段顶链中的条形码序列反向互补；其中，所述样本片段底链分别与所述日期片段和所述样本片段顶链部分杂交；且杂交后，所述日期片段中3’末端的用于进行点击化学反应的基团与所述样本片段顶链中5’末端的用于进行点击化学反应的基团位置接近且能发生点击化学反应而偶联在一起。
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