[发明专利]一种人工转录激活因子dCas9-TV及其编码基因与应用有效
申请号: | 201710896593.8 | 申请日: | 2017-09-28 |
公开(公告)号: | CN107722125B | 公开(公告)日: | 2021-05-07 |
发明(设计)人: | 李剑峰;黎镇祥;张丹丹;熊翔宇 | 申请(专利权)人: | 中山大学 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N9/22;C12N15/62;C12N15/82;C12N15/113 |
代理公司: | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人: | 张玲春 |
地址: | 510275 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明涉及一种高效的人工转录激活因子dCas9‑TV及其编码基因与应用。本发明在核酸酶失活的Cas9蛋白(dCas9)的羧基端连上多个拷贝的VP64和TAL转录激活结构域,产生一系列新型的人工转录激活因子,并筛选出转录激活活性最好的dCas9‑TV。当仅使用一个向导RNA(gRNA)靶向特定基因启动子时,dCas9‑TV能高效地激活拟南芥和水稻内源基因的转录。使用多个gRNA分别靶向多个靶基因时,dCas9‑TV能同时实现多基因的转录激活。另外,dCas9‑TV被证实在人类细胞中同样具有高效的靶向转录激活活性。利用体外组装的dCas9‑TV/gRNA核糖核蛋白复合体也能对拟南芥和水稻内源基因进行转录激活。综合以上优良活性,可将其应用基因组遗传筛选、代谢产物的生物合成通路改造、作物改良等方面。 | ||
搜索关键词: | 一种 人工 转录 激活 因子 dcas9 tv 及其 编码 基因 应用 | ||
【主权项】:
一种高效的人工转录激活因子dCas9‑TV,其特征在于,包含一个核酸酶失活的Cas9蛋白结构域和一个复合型转录激活结构域;该复合型转录激活结构域包含多个拷贝的VP64和TAL转录激活序列。
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