[发明专利]一种用动物组织提取蛋白的方法

摘要

本发明涉及一种用动物组织提取蛋白的方法，包括如下步骤（1）将新鲜的动物组织破碎之后用蒸馏水洗涤8‑10次，去除血液成分，然后挤压处理成糊状；（2）将（1）中的组织中加入0.5mol/L的TRIS‑HCl pH7.6、1%脱氧胆酸钠和0.5g/mlPMSF以及加入细球菌酸酶，混合后搅拌1小时；（3）将（2）得到的混合物离心操作30min，分离上清和沉淀物；（4）将（3）中加入0.5mol/L的TRIS‑HCl pH7.6、0.5g/mlPMSF洗涤二次，再离心操作30min，放弃上清，得到组织细胞外基质混合物；（5）将（4）得到的混合物加入NaCl后搅拌提取；本发明的优点是工业化生产、工艺流程简单和生产材料来源广泛。

主权项

一种用动物组织提取蛋白的方法，包括如下步骤：（1）将新鲜的动物组织破碎之后用蒸馏水洗涤8‑10次，去除血液成分，然后挤压处理成糊状；（2）将（1）中的组织中加入0.5mol/L的TRIS‑HCl pH7.6、1%脱氧胆酸钠和0.5g/mlPMSF以及加入细球菌酸酶，混合后搅拌1小时；（3）将（2）得到的混合物离心操作30min，分离上清和沉淀物；（4）将（3）中加入0.5mol/L的TRIS‑HCl pH7.6、0.5g/mlPMSF洗涤二次，再离心操作30min，放弃上清，得到组织细胞外基质混合物；（5）将（4）得到的混合物加入NaCl后搅拌提取；（6）将（5）的混合物离心操作1小时，放弃沉淀后得到层粘连蛋白；（7）将（5）的混合物加入2mol/L的氨基己酸和脲，离心操作1小时，放弃沉淀，得到纤连蛋白；（8）将（5）的混合物加入0.5mol/L的TRIS‑HCl pH7.6，搅拌后静置，待分离后，放弃上清液，取出沉淀结晶后，即为胶原蛋白；（9）将（3）中得到的上清稀释后通过离子交换柱，加入25mmol/L乙酸铵洗去非阳离子成分，加入10%乙酸洗脱阳离子成分，收集洗脱峰，用0.01%乙酸重悬，得到动物源抗菌肽。