[发明专利]一种高效的酵母菌染色体融合方法有效
申请号: | 201710729662.6 | 申请日: | 2017-08-23 |
公开(公告)号: | CN107299114B | 公开(公告)日: | 2021-08-27 |
发明(设计)人: | 覃重军;邵洋洋;薛小莉;鲁宁 | 申请(专利权)人: | 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 |
主分类号: | C12N15/90 | 分类号: | C12N15/90;C12N15/113;C12R1/865 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 陈静 |
地址: | 200032 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种高效的酵母菌染色体融合方法。本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9系统和酵母体内同源重组系统,进行酵母染色体融合的方法。本发明的方法可实现快速、高效的染色体融合。 | ||
搜索关键词: | 一种 高效 酵母菌 染色体 融合 方法 | ||
【主权项】:
一种对酵母的染色体A和染色体B进行融合的方法,其特征在于,所述方法包括:将着丝粒敲除组件、染色体融合组件、sgRNA靶向切割组件引入到表达Cas9蛋白的酵母中,从而获得染色体A和染色体B发生融合的酵母;其中,所述着丝粒敲除组件用于敲除两条染色体之一的着丝粒,其含有该着丝粒两侧同源序列和筛选标记;所述染色体融合组件用于在两条染色体两个端粒附近发生双交换,删除端粒且介导染色体融合,其含有染色体A近端粒区的同源序列、染色体B近端粒区的同源序列和筛选标记;所述sgRNA靶向切割组件含有能在要删除的着丝粒和两个端粒序列附近进行切割的sgRNA。
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