[发明专利]一种基于内质网应激的报告基因细胞株构建方法及其应用有效
申请号: | 201710616052.5 | 申请日: | 2017-07-25 |
公开(公告)号: | CN107189986B | 公开(公告)日: | 2020-08-11 |
发明(设计)人: | 吴兵;虞悦;陈慧梅;刘苏;张徐祥;任洪强 | 申请(专利权)人: | 南京大学 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/867;C12N15/66;C12Q1/42 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 李倩 |
地址: | 210046 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于内质网应激的报告基因细胞株构建方法,该方法选用与内质网应激相关的CHOP基因作为特异性诱导基因构建CHOP启动子,再将CHOP启动子与便于检测的SEAP基因连接,构建慢病毒CHOP‑SEAP质粒载体;最后将CHOP‑SEAP质粒转染至Hela细胞中。本发明还公开了上述基于内质网应激的报告基因细胞株构建方法构建的报告基因细胞株的应用。本发明方法构建的报告基因细胞株能够指示早期细胞毒性损伤,大大提高细胞株的检测敏感性和降低检测限值,从而表征毒害污染物的早期毒性,且适用于大多数毒害污染物;同时还可表征实际水体的综合毒性。细胞株选用的报告基因SEAP基因具有便于检测、可动态监测的优点。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 内质网 应激 报告 基因 细胞株 构建 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
一种基于内质网应激的报告基因细胞株构建方法,其特征在于:该方法选用与内质网应激相关的CHOP基因作为特异性诱导基因构建CHOP启动子,再将CHOP启动子与便于检测的SEAP基因连接,构建慢病毒CHOP‑SEAP质粒载体;最后将CHOP‑SEAP质粒转染至Hela细胞中得到所需的检测细胞株。
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