[发明专利]一种荧光定量PCR技术检测意大利蜜蜂王浆主蛋白MRJP 2基因表达的方法有效
申请号: | 201710551453.7 | 申请日: | 2017-07-07 |
公开(公告)号: | CN107164537B | 公开(公告)日: | 2020-12-11 |
发明(设计)人: | 舒蕊;范涛;代君君;刘健;章玉萍;张丽丽;陈明 | 申请(专利权)人: | 安徽省农业科学院蚕桑研究所 |
主分类号: | C12Q1/686 | 分类号: | C12Q1/686;C12Q1/6888;C12N15/11 |
代理公司: | 合肥中博知信知识产权代理有限公司 34142 | 代理人: | 钱卫佳 |
地址: | 230000 安徽省*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明公开了一种荧光定量PCR技术检测意大利蜜蜂王浆主蛋白MRJP2基因表达的方法,具体涉及生物技术领域,本发明中意大利蜜蜂MRJP 2实时荧光RT‑PCR检测方法的建立,包括以下步骤:(1)使用引物进行基因的检测和获得;(2)总RNA的提取;(3)cDNA合成;(4)实时荧光PCR;(5)苯菌灵处理前后意大利蜜蜂MRJP 2的相对表达量计算;本发明采用的实时荧光RT‑PCR与常规PCR相比,实时荧光PCR技术由自动化仪器收集荧光信号,避免了肉眼判断的主观性,进一步提高灵敏度;且RT‑PCR无须PCR后处理,避免污染,保证结果的可靠性和重复性,实时荧光RT‑PCR技术也免除常规PCR中电泳、定量扫描等后续繁琐步骤,大大缩短了实验时间。 | ||
搜索关键词: | 一种 荧光 定量 pcr 技术 检测 意大利 蜜蜂 王浆 蛋白 mrjp 基因 表达 方法 | ||
【主权项】:
一种荧光定量PCR技术检测意大利蜜蜂王浆主蛋白MRJP 2基因表达的方法,其特征在于,它是由符合荧光RT‑PCR反应特点的特异性上下游引物:MRJP 2‑F:5'‑TCGCTTCTCACGGTTTGTATT‑3'MRJP 2‑R:5'‑AGTGATTGATGCTCGTTCCAG‑3'。
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