[发明专利]一种生产胞二磷胆碱的重组微生物及生产胞二磷胆碱的方法

摘要

本发明提供了一种生产胞二磷胆碱的重组微生物以及利用该重组微生物生产胞二磷胆碱的方法，对胞二磷胆碱、胆碱及磷酸胆碱的降解及利用基因进行了敲除，并对CTP降解基因编码的5‑羟基‑CTP二磷酸酶进行了敲除，阻断了CDP前体CTP的分流。对胞二磷胆碱合成的关键酶进行了适量表达，包括将氯化胆碱磷酸化到磷酸胆碱的胆碱激酶，以及催化磷酸胆碱与CDP反应生成胞二磷胆碱的胆碱磷酸胞苷酰转移酶。另对嘧啶核苷途径进行了基因工程改造，解除合成途径的反馈抑制。通过生物发酵方法将重组菌株在5升发酵罐可达到20g/L以上的胞二磷胆碱产量，实现工业化量产，同时胞二磷胆碱的生产成本低，污染少，绿色环保，具有较高的推广应用价值。

主权项

1.一种生产胞二磷胆碱的重组微生物，其特征在于：所述重组微生物具有如下特征的一个或者多个：1）不产生参与胞二磷胆碱和/或胆碱和/或磷酸胆碱再利用的酶；2）催化氯化胆碱生成磷酸胆碱的胆碱激酶的活性高于野生型微生物；3）催化磷酸胆碱生成胞二磷胆碱的胞苷酰转移酶的活性高于野生型微生物；4）将氯化胆碱转运至胞内的内膜蛋白胆碱转运蛋白的活性高于野生型微生物。