[发明专利]一种病毒体外三维培养模型的建立方法在审
申请号: | 201710524840.1 | 申请日: | 2017-06-30 |
公开(公告)号: | CN107164299A | 公开(公告)日: | 2017-09-15 |
发明(设计)人: | 李瑞清 | 申请(专利权)人: | 太仓卡斯特姆新材料有限公司 |
主分类号: | C12N5/00 | 分类号: | C12N5/00 |
代理公司: | 苏州市方略专利代理事务所(普通合伙)32267 | 代理人: | 马广旭 |
地址: | 215434 江苏省苏州市太*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明提供了一种病毒体外三维培养模型的建立方法,包括以下操作步骤(1)微载体混悬液的准备;(2)细胞贴壁阻滞剂制备;(3)准备6孔板,将制备好的细胞贴壁阻滞剂均匀铺在6孔板里,静置风干,再将制备好的细胞以105/ml的浓度接种于6孔板中,再加入制备好的微载体混悬液,细胞液与微载体混悬液的比例为41,混匀后,放置于细胞培养箱内,3‑4天等细胞三维结构成型后,即可进行病毒接种实验。该方法既能避免动物体内实验带来的高成本,又能最大程度的模拟动物体内生长模式,使所培养的细胞呈现立体生长方式,形成类似体内的组织结构,进而有助于模拟病毒体内的致病过程,该模型方法简便,成本低廉,推广方便。 | ||
搜索关键词: | 一种 病毒 体外 三维 培养 模型 建立 方法 | ||
【主权项】:
一种病毒体外三维培养模型的建立方法,其特征在于:包括以下操作步骤(1)微载体混悬液的准备:称取1‑3份的微载体,置于玻璃容器内,按照微载体1份:50ml磷酸盐缓冲液的比例加入磷酸盐缓冲液,混匀1‑3h,然后再用新鲜的清洗液洗涤2‑3次,再按照微载体1份:50ml磷酸盐缓冲液的比例加入新鲜的磷酸盐缓冲液,高压灭菌,冷却后4℃保存;(2)细胞贴壁阻滞剂制备:按照2.5%的浓度制备,称取细胞贴壁阻滞剂粉末,加入无水乙醇,密封后混匀10‑30分钟,4℃保存;(3)准备6孔板,将制备好的细胞贴壁阻滞剂均匀铺在6孔板里,静置风干,再将制备好的细胞以105/ml的浓度接种于6孔板中,再加入制备好的微载体混悬液,细胞液与微载体混悬液比例为4:1,混匀后,放置于细胞培养箱内,3‑4天等细胞三维结构成型后,即可进行病毒接种实验。
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