[发明专利]血滞通胶囊的指纹图谱及高效液相色谱鉴别方法

摘要

本发明公开了一种血滞通胶囊的指纹图谱及高效液相色谱鉴别方法。本发明首先公开了一种血滞通胶囊指纹图谱的建立方法，包括：(1)将血滞通胶囊内容物加入提取溶剂进行提取，得到提取液，纯化，得到供试品溶液；(2)将供试品溶液进行高效液相色谱分析，获得高效液相色谱图；(3)从高效液相色谱图的色谱峰中选择共有峰，得到血滞通胶囊指纹图谱。本发明进一步公开了所述方法建立的血滞通胶囊指纹图谱。本发明还公开了一种血滞通胶囊的高效液相色谱鉴别方法，该方法能够准确鉴别血滞通胶囊中的腺苷和紫丁香苷，精密度、稳定性及重复性良好。本发明所建立的血滞通胶囊的指纹图谱及高效液相色谱鉴别方法，在血滞通胶囊的质量控制中具有应用前景。

主权项

1.一种血滞通胶囊指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将血滞通胶囊内容物加入50%甲醇为提取溶剂进行提取，得到提取液，纯化，得到供试品溶液；（2）将供试品溶液进行高效液相色谱分析，获得高效液相色谱图；所述高效液相色谱分析的色谱条件包括：色谱柱为Grace Apollo C18色谱柱，规格为4.6mm×250mm，5μm；十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A为水，B为甲醇，进行梯度洗脱；所述梯度洗脱的程序包括：按体积百分比计，0‑15min，A：95→85%，B：5→15%；15‑20min，A：85→80%，B：15→20％；20‑30min，A：80→60%，B：20→40％；30‑45min，A：60→55%，B：40→45％；45‑50min，A：55→95%，B：45→5％；流速为0.8ml/min；柱温为40℃；进样量为10μl；检测波长为220nm；（3）从高效液相色谱图的色谱峰中选择共有峰，得到血滞通胶囊指纹图谱；所述共有峰的选择包括：在12min‑45min时间区间内，从多批供试品溶液高效液相色谱图中选择四个色谱峰作为共有峰，分别标记为峰1、峰2、峰3及峰4；以紫丁香苷峰为标准峰，各共有峰的相对保留时间为：峰1的相对保留时间为0.515‑0.593，峰2的相对保留时间为0.735‑0.845，峰3的相对保留时间为1.000，峰4的相对保留时间为1.168‑1.344；其中，所述纯化采用中性氧化铝柱层析，所述中性氧化铝柱层析纯化包括：将提取液滤过，取续滤液，蒸干；将蒸干后得到的残渣加50%甲醇溶解，加在中性氧化铝柱上，用50%甲醇洗脱，收集流出液及洗脱液，蒸干；将蒸干后得到的残渣用50%甲醇溶解，即得；其中，所述中性氧化铝柱中的中性氧化铝的用量为4g，所述中性氧化铝的粒度为100‑200目。