[发明专利]将消化道来源上皮细胞重编程为内胚层干/祖细胞的方法及应用有效
申请号: | 201710389711.6 | 申请日: | 2017-05-27 |
公开(公告)号: | CN107142240B | 公开(公告)日: | 2021-01-29 |
发明(设计)人: | 王韫芳;王术勇;张文成;覃金华;王璇;常铭洋;闫舫;裴雪涛 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院野战输血研究所 |
主分类号: | C12N5/0735 | 分类号: | C12N5/0735 |
代理公司: | 北京尚诚知识产权代理有限公司 11322 | 代理人: | 鲁兵 |
地址: | 100850*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种将消化道来源上皮细胞重编程为内胚层干/祖细胞的方法,是以人胃上皮细胞(hGECs)作为起始细胞,以人胃肌成纤维细胞(aGSEMFs)来作为滋养层,用选自FBP、Bay K 8644、Bix01294、SB431542或A83‑01、VPA、RG108、PD0325901和PS48中的全部或多个包括SB或A83在内的化合物组合将消化道来源上皮细胞重编程为内胚层干/祖细胞,该内胚层干/祖细胞可用于向肝脏细胞、胰腺β细胞和肠细胞方向诱导分化。 | ||
搜索关键词: | 消化道 来源 上皮细胞 编程 胚层 细胞 方法 应用 | ||
【主权项】:
将消化道来源上皮细胞重编程为内胚层干/祖细胞的方法,包括以下步骤:1)将原代分离的消化道来源上皮细胞作为起始细胞,扩增培养所述消化道来源上皮细胞;2)用丝裂霉素‑C处理滋养层细胞后清洗,并用酶消化细胞后备用;3)将步骤2)准备的滋养层细胞添加于步骤1)扩增培养的消化道来源上皮细胞中,继续共培养过夜;4)第2天更换为重编程培养基,每2‑3天换一次培养基,培养7‑15天,得到诱导内胚层干/祖细胞(hiEndoPCs)克隆。
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