[发明专利]一种饮用水中四环素抗性细菌的流式细胞仪检测方法在审

专利信息
申请号: 201710384363.3 申请日: 2017-05-26
公开(公告)号: CN107121375A 公开(公告)日: 2017-09-01
发明(设计)人: 李伟英;陈继平;张骏鹏;陈俊宇;吴璇;黄圣洁;周文颖 申请(专利权)人: 同济大学
主分类号: G01N15/14 分类号: G01N15/14
代理公司: 上海科盛知识产权代理有限公司31225 代理人: 林君如
地址: 200092 *** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明涉及一种饮用水中四环素抗性细菌的流式细胞仪检测方法,包括以下步骤(1)取待测水样加入棕色试管中,加入四环素母液,使待测水样中四环素浓度等于其MIC值,再将其置于培养箱中,在27℃下培养24h;(2)取培养后的水样转移至流式细胞仪进样管中,加入SYBR Green I染色剂和碘化丙啶染色剂染色,充分震荡后37℃下避光培养10~15min;(3)再将培养后的流式细胞仪进样管转移至流式细胞仪中,开始进样,并测定四环素抗性细菌数,再除以进样体积,即得到饮用水中四环素抗性细菌的浓度。与现有技术相比,本发明利用流式细胞仪检测四环素抗性细菌数量,具有快速、准确和定量的优点,克服了传统的培养法不能检测出不可培养的抗性细菌的缺点,结果更加可靠。
搜索关键词: 一种 饮用 水中 四环素 抗性 细菌 细胞 检测 方法
【主权项】:
一种饮用水中四环素抗性细菌的流式细胞仪检测方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)取待测水样加入棕色试管中,加入四环素母液,使待测水样中四环素浓度等于其MIC值,再将其置于培养箱中,在27℃下培养24h;(2)取培养后的水样转移至流式细胞仪进样管中,加入SYBR Green I染色剂和碘化丙啶染色剂染色,充分震荡后37℃下避光培养10~15min;(3)再将培养后的流式细胞仪进样管转移至流式细胞仪中,开始进样,并测定活细胞数,即四环素抗性细菌数,将测出的四环素抗性细菌数除以进样体积,即得到饮用水中四环素抗性细菌的浓度。
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