[发明专利]嵌合蜘蛛丝及其用途

摘要

本申请涉及嵌合蜘蛛丝及其用途。披露了被工程化为拥有并表达嵌合蜘蛛丝蛋白基因的转基因蚕，该基因编码具有对于蜘蛛丝弹性和/或强度基序序列是特定的蜘蛛丝结构域的嵌合蜘蛛丝蛋白。还提供了具有相对于天然蚕丝纤维改进的强度(张力)和弹性特征的改进的蚕丝纤维。还提供了采用在此披露的转基因蚕制备嵌合丝纤维的改进的方法，该方法采用基于piggyBac的载体系统和辅助质粒。提供了基因表达盒，且其用于创造多种合成的蜘蛛丝编码序列(蜘蛛2、蜘蛛4、蜘蛛6、蜘蛛8)。在辅助质粒的存在下，使用piggyBac载体系统转化突变的蚕，以将嵌合蜘蛛丝基因合并入蚕中以提供稳定的转化体。因而这些转基因蚕提供了适于丝纤维的商业生产的有效的蜘蛛丝生产有机体。

主权项

一种编码嵌合蜘蛛丝多肽的核酸，其中所述嵌合蜘蛛丝多肽在N‑末端到C‑末端方向上包括：(a)家蚕丝丝心蛋白重链(fhc)多肽的N‑末端结构域(NTD)；(b)一个或更多个重复片段，所述一个或更多个重复片段包括一个或更多个蜘蛛丝基序，其中每个重复片段包括一个或更多个拷贝的弹性基序，所述一个或更多个拷贝的弹性基序在线性N‑末端到C‑末端方向上共价连接到一个或更多个强度基序；以及(c)家蚕丝fhc多肽的C‑末端结构域(CTD)；其中所述弹性基序包括一个或更多个鞭状样(Flag‑样)基序、大腺丝蛋白样(MaSp‑样)基序或小腺丝蛋白样(MiSp‑样)基序；并且其中所述一个或更多个MaSp‑样基序包括一个或更多个MaSp1基序或MaSp2基序；其中所述鞭状样弹性基序是选自由SEQ ID NO 27‑29组成的组的一致序列中的重复氨基酸基序；其中所述MaSp‑样弹性基序是选自由SEQ ID NO 18‑23组成的组的一致序列中的重复氨基酸基序；并且所述MiSp‑样弹性基序是选自由SEQ NO 24‑26组成的组的一致序列中的重复氨基酸基序。