[发明专利]一种宫颈细胞瓦博格效应简易检测试剂及其制备方法和应用

摘要

本发明涉及一种宫颈细胞瓦博格效应简易检测试剂及其制备方法和应用。所述试剂由试剂A、试剂B、试剂C和试剂D组成；试剂A为4‑6%的枯草杆菌蛋白酶等渗溶液；试剂B为pH 3.5‑6.0的醋酸盐缓冲液；试剂C由0.1 g/L‑0.25 g/L的3,3’,5,5’‑四甲基联苯胺溶液、1.0 mL/L‑2.5 mL/L的6‑甲氧基喹啉溶液和2‑5mL/L的过氧化羟基异丙苯溶液组成；试剂D由0.03‑0.07%甲苯胺蓝O溶液、2.5‑7.5 mL/L的曲拉通X‑100溶液组成。所述试剂可用于定性检测宫颈脱落细胞的细胞游离亚铁原卟啉和活性氧含量，判断宫颈细胞的瓦博格效应强弱。

主权项

1.一种宫颈细胞瓦博格效应简易检测试剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）试剂A的制作：将枯草杆菌蛋白酶加入等渗溶液中溶解得4‑6 % w.t的试剂A；（2）试剂B的制作：a）将醋酸钠与冰醋酸分别溶解于纯净水中；b）将两种溶液混匀得pH 3.6‑6.0的试剂B；（3）试剂C的制作：a）将3,3’,5,5’‑四甲基联苯胺溶于少量无水乙醇中；b）将过氧化羟基异丙苯和6‑甲氧基喹啉依次加入上述a）溶液中溶解；c）纯净水定容，即得试剂C；其中，3,3’,5,5’‑四甲基联苯胺溶液浓度为0.1 g/L‑0.25 g/L，6‑甲氧基喹啉的浓度为1.0 mL/L‑2.5 mL/L，过氧化羟基异丙苯的浓度为2‑5mL/L；（4）试剂D的制作：a）甲苯胺蓝O溶于纯净水；b）曲拉通X‑100加入上述a）溶液中溶解，即得试剂D；其中，甲苯胺蓝O的浓度为0.03‑0.07 %w.t，曲拉通X‑100的浓度为2.5‑7.5 mL/L；所述试剂A、试剂B、试剂C和试剂D的体积比为2:1:1:1。