[发明专利]一种快速检测阪崎克罗诺杆菌的试剂盒及其应用

摘要

本发明公开了一种快速检测阪崎克罗诺杆菌的试剂盒及其应用，属于微生物检测技术领域。本发明试剂盒包括酶标孔、信号增强型试纸条、第一金标抗体和第二金标抗体；信号增强型试纸条的检测线上包被有抗阪崎克罗诺杆菌捕获抗体，控制线上包被有羊抗鼠二抗；第一金标抗体上包被有抗阪崎克罗诺杆菌检测抗体，且由BSA封闭结合位点；第二金标抗体上包被有抗BSA抗体；第一金标抗体和第二金标抗体结合形成双金标抗体。本发明的试剂盒灵敏度高，较传统型试纸条灵敏度提高了100倍，稳定性好，特异性强，检测时间短，制作简便且成本低，方便携带，为现场快速检测阪崎克罗诺杆菌提供了有效工具。

主权项

1.一种利用快速检测阪崎克罗诺杆菌试剂盒检测阪崎克罗诺杆菌的方法，其特征在于，所述快速检测阪崎克罗诺杆菌试剂盒包括酶标孔(A)、信号增强型试纸条、第一金标抗体(C)和第二金标抗体(D)；所述信号增强型试纸条包括样品垫(1)、结合垫(2)、NC膜(3)、吸水垫(4)和底板(5)，所述NC膜(3)上设有检测线(6)和控制线(7)，所述检测线(6)上包被有抗阪崎克罗诺杆菌捕获抗体，所述控制线(7)上包被有羊抗鼠二抗；所述第一金标抗体(C)上包被有抗阪崎克罗诺杆菌检测抗体，且由BSA封闭结合位点；所述第二金标抗体(D)上包被有抗BSA抗体；所述第一金标抗体(C)中胶体金粒径为26nm；所述第二金标抗体(D)中胶体金粒径为42nm；所述检测阪崎克罗诺杆菌的方法包括如下步骤：1)在酶标孔(A)中加入100uL样品液和8uL第一金标抗体(C)，室温下孵育4min；2)再向酶标孔(A)中加入8uL第二金标抗体(D)，混匀，由此所述第一金标抗体(C)和第二金标抗体(D)结合形成双金标抗体；3)将信号增强型试纸条插入酶标孔(A)中进行检测，10min后观察检测结果；4)判定方法：若信号增强型试纸条的检测线(6)、控制线(7)都出现红色条带，表明样品液中含有阪崎克罗诺杆菌，阳性结果；若检测线(6)未出现红色条带，控制线(7)出现红色条带，表明样品液中不含有阪崎克罗诺杆菌，阴性结果；若控制线(7)未出现红色条带，表明试纸条失效；其中检测线(6)颜色越深，表明样品液中含有的阪崎克罗诺杆菌浓度越高。