[发明专利]一种富含脂肪干细胞和细胞外基质的脂肪凝胶制备方法

摘要

本发明公开了一种富含脂肪干细胞和细胞外基质的脂肪凝胶制备方法，通过物理切割方法将移植脂肪材料中的成熟脂肪细胞及细胞外基质进行破碎，使用脂肪乳化器进行过滤乳化，去除脂肪中未破碎成分，得乳糜状脂肪，采用絮凝沉淀技术，使用聚乙二醇将乳糜状脂肪中的油脂汇集并去除，得富含脂肪干细胞和细胞外基质的脂肪凝胶，本方法获取的脂肪凝胶因为去除成熟的脂肪细胞及油脂，使原有脂肪体积浓缩了近十倍，脂肪干细胞及细胞外基质含量远高于普通脂肪，为脂肪移植填充提供了良好的材料。

主权项

一种富含脂肪干细胞和细胞外基质的脂肪凝胶制备方法，包括以下步骤：1）用带螺纹注射器抽取移植用脂肪颗粒，在抽取的脂肪颗粒中添加肝素钠，上、下颠倒带螺纹注射器将其混匀；2）将上述脂肪颗粒放入第一离心管中，以1200g/min速度离心3min，离心后，脂肪颗粒分为上、下两层，去除下层膨胀液后，将上层的脂肪颗粒转移至第一注射器中；3）将装有脂肪颗粒的带螺纹注射器与第二注射器通过脂肪破碎器连接，推动含有脂肪颗粒的带螺纹注射器的活塞，将脂肪颗粒通过脂肪破碎器推注至对侧的第一注射器中，推注速度为5‑10ml/s，如此反复推注50次，得到破碎脂肪；4）将装有破碎脂肪的第二注射器拧下，通过脂肪乳化器与第三注射器对接，推动含有破碎脂肪的第二注射器活塞，将破碎脂肪通过脂肪乳化器推注至第三注射器中，推注速度为5‑10ml/s，乳化一次，得到乳糜状脂肪；5）将乳糜状脂肪放入到第二离心管中，按照乳糜状脂肪的体积，加入聚乙二醇进行脂肪萃取，将乳糜状脂肪和聚乙二醇的混合物上下缓慢颠倒，可见黄色油脂汇集，并有絮状物生成，完成油脂的抽提；6）将油脂抽提后装有混合液装入第四注射器以3000g/min的速度离心10min，离心后，混合液分为上、中、下三层，下层为萃取剂层，中层为脂肪凝胶层，上层为油脂层；7）轻推第四注射器，去掉下层的萃取剂后，将第四注射器与第五注射器通过三通对接，收取中层脂肪凝胶层进入第五注射器中，得到高度浓缩的脂肪凝胶。