[发明专利]一种特异性识别胶原蛋白的胶原多肽探针及其制备和成像方法有效
| 申请号： | 201710258480.5 | 申请日： | 2017-04-19 |
| 公开（公告）号： | CN107266562B | 公开（公告）日： | 2020-12-18 |
| 发明（设计）人： | 肖建喜;蔡向东;李婷婷;赵莎 | 申请（专利权）人： | 武汉采思生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/78 | 分类号： | C07K14/78;C07K1/06;C07K1/04;C07K1/107;G01N21/64;A61K49/00 |
| 代理公司： | 北京力量专利代理事务所(特殊普通合伙) 11504 | 代理人： | 李婷玉 |
| 地址： | 430074 湖北省武汉市东湖开发区大学路以*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种特异性识别胶原蛋白的胶原多肽探针及其制备和成像方法。其包括：胶原多肽探针的设计，设计特定氨基酸序列的胶原多肽，包括:①、中间含有较多的((Gly‑Pro‑Hyp)n或(Gly‑Pro‑Pro)n重复序列，以帮助多肽可以与胶原蛋白特异性结合；②、多肽序列的特定位置修饰发光物质；胶原多肽探针的制备，通过固相合成法，合成特定序列的胶原多肽，再使用发光物质修饰该胶原多肽；胶原纤维染色；体外成像。本发明设计的胶原多肽探针制备简单，检测方便，无生物毒性，能特异性的结合胶原蛋白，在肿瘤，关节炎等胶原蛋白相关疾病的早期检测与疗效评价等领域具有巨大的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 特异性 识别 胶原 蛋白 多肽 探针 及其 制备 成像 方法 | ||
【主权项】：
一种特异性识别胶原蛋白的胶原多肽探针及其制备和成像方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)胶原多肽探针的设计设计特定氨基酸序列的胶原多肽，包括:①、中间含有较多的(Gly‑Pro‑Hyp)n或(Gly‑Pro‑Pro)n重复序列，以帮助多肽可以与胶原蛋白特异性结合；②、多肽序列的特定位置修饰发光物质；(2)胶原多肽探针的制备通过固相合成法，合成特定序列的胶原多肽，再使用发光物质修饰该胶原多肽；(3)胶原纤维染色在胶原纤维分散液中加入胶原多肽探针溶液，4℃孵育3h，离心弃上清液，用1x PBS洗掉未结合探针；(4)体外成像在组织切片上加封闭液，放置10‑50min后吸走液体，使用探针溶液染色，在2‑6℃孵育1‑3hrs，吸去染色液后，使用DAPI稀释液染色，使用1x PBS洗掉未结合探针和过量DAPI稀释液，滴封固液，加盖玻片，使用荧光显微镜观察拍照；(5)体内成像将胶原多肽探针注射入实验活体内，然后麻醉后放入成像装置中进行成像试验。
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