[发明专利]度骨化醇注射液中含量的计算方法

摘要

本发明公开了一种度骨化醇注射液中含量的计算方法：通过氢氧化钠水溶液对度骨化醇破坏生成度骨化醇前体和5,6‑反式度骨化醇，和既定色谱条件下度骨化醇和5,6‑反式度骨化醇响应因子,计算破坏前的度骨化醇标准品浓度，破坏后生成的5,6‑反式度骨化醇浓度、未破坏的度骨化醇浓度，可得破坏后度骨化醇前体浓度，根据破坏后度骨化醇前体峰面积，计算出前体响应因子，可得前体折算为度骨化醇的校正因子，在测试注射液含量时可直接将代入计算。该方法通过实践检验具有可操作性，且对度骨化醇转变为前体的程度没有要求，准确度高，简单方便，可实现对注射液中度骨化醇含量的有效控制。

主权项

1.一种度骨化醇注射液中含量的计算方法，其特征在于包括如下步骤：(A)取度骨化醇标准品和5,6‑反式度骨化醇标准品，分别在溶剂中溶解成度骨化醇标准品溶液和5,6‑反式度骨化醇标准品溶液并稀释后，采用高效液相色谱法分别测定度骨化醇峰面积和5,6‑反式度骨化醇峰面积，并计算度骨化醇的响应因子和5,6‑反式度骨化醇的响应因子；(B)取度骨化醇标准品，在溶剂中溶解成度骨化醇标准品溶液后，加入氧氢化钠，于70～85℃下进行破坏反应，反应后将反应液稀释，采用高效液相色谱法分别测定反应液中度骨化醇、度骨化醇前体和5,6‑反式度骨化醇峰面积，分别计算度骨化醇标准品溶液破坏前的度骨化醇浓度、度骨化醇标准品溶液破坏后余留的度骨化醇浓度、度骨化醇标准品溶液破坏后生成的5,6‑反式度骨化醇浓度，并计算度骨化醇前体的响应因子和度骨化醇前体折算为度骨化醇的校正因子；(C)将度骨化醇注射液和稀释后的度骨化醇标准品溶液采用高效液相色谱法，分别测定度骨化醇标准品溶液中度骨化醇和度骨化醇前体的峰面积以及度骨化醇注射液中度骨化醇和度骨化醇前体的峰面积，由此计算度骨化醇注射液中的度骨化醇的有效浓度和度骨化醇注射液的有效含量；其中，度骨化醇注射液中的度骨化醇的有效浓度C注效和度骨化醇注射液的有效含量％注含的计算方法为：C注效＝C标效*(A度注+F校*A前注)/(A度标+F校*A前标)；％注含＝C注效/C样称*％样含；A度注：度骨化醇注射液中度骨化醇的峰面积；F校：度骨化醇前体折算为度骨化醇的校正因子；C标效：度骨化醇标准品溶液中的度骨化醇的有效浓度；A前注：度骨化醇注射液中度骨化醇前体的峰面积；A度标：度骨化醇标准品溶液中度骨化醇的峰面积；A前标：度骨化醇标准品溶液中度骨化醇前体的峰面积；C样称：配制度骨化醇注射液时称取量折算的度骨化醇浓度；％样含：配制注射液的度骨化醇原料药含量；步骤(A)、(B)或(C)中的液相色谱条件为：仪器：WATERS；色谱柱：Kinetex C18；检测波长：275nm；流速：1.2ml/min；柱温：30～35℃；运行时间：55min；流动相A：乙腈或甲醇，流动相B：水；洗脱梯度：0～10min：75％A：25％B；10～30min：85％A：15％B；30～45min：0％A：100％B；45～55min：75％A：25％B。