[发明专利]一种香樟的组织培养方法

摘要

本发明提供一种香樟的组织培养方法，涉及植物培育繁殖技术领域，本发明的香樟的组织培养方法包括如下步骤(一)外植体的准备、(二)外植体的预处理、(三)培养基的培养、(四)大棚炼苗；其中，步骤(三)还包括(1)诱导培养、(2)增殖培养和(3)生根培养的步骤；本发明的香樟的组织培养方法在含有不同激素配比的WPM培养基上诱导香樟的愈伤组织，通过诱导培养基、增殖培养基以及生根培养基的培养，获得香樟的再生苗，其培养方法取材方便，材料来源、数量充足，容易获得无菌材料，能够用较少的优良母本，繁殖出大批量的种苗，适用于规模化生产。

主权项

一种香樟的组织培养方法，其特征在于，具体包括如下步骤：(一)外植体的预处理：剪取经过挖根处理后长出的嫩芽作为外植体，将外植体剪成4‑6cm的条状物，然后用大蒜汁将外植体浸泡15‑30min，浸泡过程不断进行振荡，浸泡完成后用无菌水将外植体冲洗4‑6次，然后放置于无菌接种盘吹干其表面水分，切去叶片以及旧的切口，切成2‑2.5cm带3个芽的茎段，将带芽茎段置于自来水下冲洗30min，用滤纸吸干带芽茎段备用；(二)培养基的培养：(1)诱导培养：将上述步骤获得的带芽茎段先接种到诱导培养基上，黑暗条件下培养5‑10天，然后按光照和黑暗时间比为2:1交替进行诱导培养，诱导新芽长高至4‑5cm后，将新芽的叶片切去，切成2‑3cm的茎段；所述诱导培养基含有WPM培养基+2.5mg/L 6‑BA+0.25mg/L NAA+4.5g/L琼脂+30g/L蔗糖；(2)增殖培养：将步骤(1)培养后处理得到的茎段接种到增殖培养基上培养35‑40天后，将新芽转到新的增殖培养基培养，增殖倍数达到3‑4倍；所述增殖培养基的成分为：WPM+2.0mg/L 6‑BA+0.5mg/L NAA+3.5g/L琼脂+25g/L蔗糖；(3)生根培养：将经步骤(2)增殖培养得到的丛芽切除其多余的侧面芽或不定芽，按照高度为1.5‑3cm将具有单芽的小枝剪切下来，然后将剪切后的小枝放到生根培养基进行生根培养，培养24‑26天后即可出瓶炼苗；所述生根培养基的成分为：WPM+2.0mg/L生根粉+4.5g/L琼脂+30g/L蔗糖；(三)大棚炼苗：用镊子将小苗从培养器皿中取出，用自来水将小苗根部的培养基洗净，然后种植到培养土苗盘里并喷淋定根水，待叶面干后，喷施800‑1000倍液的农用链霉毒，7‑15天后喷施20‑30倍的沼气液，在大棚内培育3‑5个月后进行移栽。