[发明专利]天山堇菜中具有二聚哌啶类Ⅲ和Ⅳ型骨架的生物碱化合物及制备方法

摘要

本发明涉及一种天山堇菜中具有二聚哌啶类Ⅲ和Ⅳ型骨架的生物碱化合物及制备方法；该化合物1为天山堇宁A，化合物2为天山堇宁B，化合物3为天山堇啶；该方法采用甲醇溶剂对天山堇菜全草进行提取，通过酸溶碱沉法制得总生物碱，总生物碱利用两相溶剂分配法进行分配得到上相（有机相）部位，上相部位再利用葡聚糖凝胶色谱法以及正反相色谱法分离得到Ⅲ和Ⅳ型骨架生物碱化合物1为天山堇宁A，化合物2为天山堇宁B，化合物3为天山堇啶。

主权项

1.一种天山堇菜中二聚哌啶类化合物的制备方法，其特征在于该化合物为天山堇宁A、天山堇宁B和天山堇啶，其结构式为：其中：1为化合物天山堇宁A；2为化合物天山堇宁B；3为化合物天山堇啶，具体操作按下列步骤进行：a、将天山堇菜全草粉碎，用无水甲醇溶剂冷浸回流、渗漉、超声或微波提取2‑10次，合并提取液并干燥，得到总提取物；b、将步骤a中的总提取物用氯仿溶解，用水进行萃取，收集氯仿层并干燥得氯仿部位，再将氯仿部位用0.5N的硫酸溶解过滤，收集滤液，滤液用乙酸乙酯萃取以去除非生物碱杂质，去杂质的滤液用饱和碳酸氢钠水溶液调pH至10‑14，得到碱化液；c、将步骤b中的碱化液用二氯甲烷充分萃取并干燥，得到总生物碱；d、将步骤c中的总生物碱用体积比5:5:5:5‑1:5:1:5的正己烷:乙酸乙酯:甲醇:水的两相溶剂系统进行分配，收集上相有机相，干燥得到上相部位，再将上相部位进行正相硅胶柱层析分段分离，以体积比100:0，85:15，70:30，55:45的环己烷:乙酸乙酯为洗脱溶剂进行梯度洗脱，得到4个部位为V100，V85，V70和V55；e、将步骤d中的V70部位以无水甲醇为溶剂，经葡聚糖凝胶LH‑20分离得到V70‑1组分，将V70‑1组分利用反相色谱柱：YMC Pydrosphere C18 5μm 10×250mm；溶剂：浓度为34％的乙腈水溶液；流速：4.0mL/min进行分离，分别收集并干燥2.5分钟至6.5分钟的流份V70‑1‑1，18.5分钟至19.5分钟的流份V70‑1‑6，以及20分钟至21分钟的流份V70‑1‑7，再将流份V70‑1‑1继续用反相色谱柱：YMC Pydrosphere C18 5μm 10×250mm；溶剂：浓度为37％的甲醇水溶液；流速：3.1mL/min进行纯化，收集50至53分钟的流份，干燥即得化合物3天山堇啶；将流份V70‑1‑6继续用反相色谱柱：YMC Pydrosphere C18 5μm 10×250mm；溶剂：浓度为59％的甲醇水溶液；流速：2.8mL/min进行纯化，收集21.5至23分钟的流份，干燥即得化合物2天山堇宁B，将流份V70‑1‑7继续用反相色谱柱：YMC Pydrosphere C18 5μm10×250mm；溶剂：浓度为52.8％的甲醇水溶液；流速：4.0mL/min进行纯化，收集31.5至33.5分钟的流份，干燥既得化合物1天山堇宁A。