[发明专利]一种沙门氏菌的检测方法及检测试剂盒

摘要

本发明公开了一种沙门氏菌的检测方法及检测试剂盒。以沙门氏菌特异性核酸适体为分子识别元件，在沙门氏菌作用下打开茎环结构核酸H1，并与茎环结构核酸H2相互作用，形成部分双链DNA，包含核酸内切酶识别序列，在核酸内切酶的作用下切割H2，释放富含G碱基的核酸序列。在Hemin的作用下，形成具有类似HRP催化活性的G四聚体结构，可催化氧化显色反应，使无色底物变成蓝色。本发明方法具有较高的灵敏度，其检测限位10 cfu/mL；还具有很好的特异性，常见的其他菌对检测不产生影响。整个检测过程可在室温下完成，具有操作简单、经济便宜等优点。检测结果可直接观察，无需使用检测仪器。可直接检测活菌，无需对菌进行裂解。

主权项

1.一种沙门氏菌的检测试剂盒，其特征在于，包括氯高铁血红素、杂交缓冲液、显色缓冲液体系、核酸内切酶和下列核酸序列：核酸序列H1：依次具有A、B、C区域，其中A区是沙门氏菌的核酸适体，C与A部分互补形成茎环结构的茎部分，A与C不互补的序列凸起于茎环结构外侧，B构成茎环结构的环部分，B中包含一段与H2的H区互补配对的核酸序列；核酸序列H2：依次具有D、F、H、G、E区域，其中D和E区域互补形成茎环结构的茎部分，F和G区域是富含G碱基的序列，H区域为核酸内切酶的识别位点序列；H区域与H1的B区域部分核酸序列互补，形成部分双链DNA；所述核酸内切酶为识别双链切割单链的核酸内切酶。