[发明专利]一种制备高效定制分子量的褐藻糖胶的方法及其应用

摘要

本发明公开了一种制备高效定制分子量的褐藻糖胶的方法及其应用，包括以海带褐藻糖胶为原料，将其微波溶解、超声降解得褐藻糖胶降解液；将褐藻糖胶降解液利用高流速琼脂糖凝胶色谱分级，收集获得目的分子量的低分子量褐藻糖胶溶液，并将其它高分子量褐藻糖胶溶液再次进行超声波降解，利用高流速琼脂糖凝胶色谱分级，收集目的分子量的低分子量褐藻糖胶溶液，合并所有目的褐藻糖胶溶液；利用纳滤膜过滤所得目的褐藻糖胶溶液，脱盐并浓缩，再次稀释褐藻糖胶浓缩液再纳滤浓缩脱盐；乙醇溶液沉淀褐藻糖胶，洗涤，干燥获得低分子量褐藻糖胶产品。该方法最大限度的保留了褐藻糖胶的活性成分，所得目标产品高纯均一小分子量褐藻糖胶产品纯度高达95％以上。

主权项

一种制备褐藻糖胶产品的方法，其特征是，包括以下步骤：（1）原料：从海带提取获得的褐藻糖胶产品固体，其来源于专利CN106008730A中实施例1中步骤（9）中制备得到的褐藻糖胶粗品，将按质量浓度4%（w/v）配制成溶液；（2）微波强制溶解，微波频率在1000MHz，处理5次，间隔5min，每次10s；（3）超声波降解，将步骤（2）中完全溶解的褐藻糖胶溶液进行超声波处理，以降低大分子褐藻糖胶的分子量，超声波频率是60KHz，处理时间为20min；（4）褐藻糖胶分级，采用高流速琼脂糖凝胶色谱分级体系，采用0~1.5mol/L的NaCl溶液作为流动相，进行洗脱，流动相流速为0.12m/h，获得不同分子量的褐藻糖胶溶液，收集目的分子量的褐藻糖胶溶液，并将大分子量的褐藻糖胶溶液返回步骤（3）进行重复降解三次；（5）纳滤浓缩脱盐，将步骤（4）中获得的目的分子量的褐藻糖胶溶液进行纳滤浓缩并脱盐，纳滤膜截留分子量范围是200Da，并控制温度在35℃以下，采用目的分子量褐藻糖胶溶液体积2倍体积的蒸馏水对纳滤浓缩的褐藻糖胶溶液稀释，并再次纳滤浓缩达到脱盐目的；（6）乙醇沉淀，向步骤（5）中所得目的分子量褐藻糖胶浓缩液中加入一定体积的乙醇，沉淀褐藻糖胶，乙醇体积分数为75%（v/v），沉淀60min，5000g离心10min后，得沉淀再采用体积分数为85%（v/v）乙醇溶液洗涤两次，5000g离心10min后所得沉淀即为目标褐藻糖胶产物；（7）通风加热干燥，将步骤（6）中所得沉淀75℃通风干燥，即获得了目的分子量褐藻糖胶产品，该产品的纯度为 98.5%，产品收率为90%，分子量为 6500±350 Da。