[发明专利]一种微生物谷氨酰胺转胺酶稳定性的检测方法有效
| 申请号： | 201710150810.9 | 申请日： | 2017-03-14 |
| 公开（公告）号： | CN108570491B | 公开（公告）日： | 2022-01-11 |
| 发明（设计）人： | 金明飞;王志珍;常忠义;高红亮;陈中山;王玲转;易正芳;步国建 | 申请（专利权）人： | 华东师范大学;泰兴市东圣生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/48 | 分类号： | C12Q1/48;C12N9/10 |
| 代理公司： | 上海麦其知识产权代理事务所(普通合伙) 31257 | 代理人： | 董红曼 |
| 地址： | 200062 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种微生物谷氨酰胺转胺酶MTGase稳定性的检测方法，将MTGase溶液pH调节至5.0‑6.0，然后进行阳离子交换层析；洗脱缓冲液pH为8.0‑9.0，洗脱方法为线性洗脱，经平衡缓冲液和洗脱缓冲液pH梯度洗脱，分离得到MTGase的两个同分异构体(MTGase I1和MTGase I2)，根据MTGase I2/MTGase I1的比值可以测定MTGase的稳定性。本发明还公开了一种MTGase同分异构体的分离方法。本发明方法简单、快捷，灵敏度高，为MTGase的生产品控环节提供更方便、快捷、可靠的检测方法，同时对MTGase后期应用稳定性的控制提供技术保障。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 微生物 谷氨酰胺 转胺酶 稳定性 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一种MTGase稳定性的检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)MTGase溶液的制备将MTGase溶解在缓冲液中，调节溶液pH为5.0‑6.0，离心收集，得到MTGase上清液；(2)离子交换层析将步骤(1)制备得到的MTGase上清液进行阳离子交换层析；(3)MTGase I2/MTGase I1的比值确定离子交换层析过程中，随着洗脱缓冲液的比例不断增加，洗脱得到的MTGase的pH不断增加，根据pH的变化可以分离得到MTGase的两个同分异构体MTGase I1和MTGase I2，分别根据洗脱峰计算峰积分面积，计算两个同分异构体的峰面积比值。
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