[发明专利]一种制备基于蛋白A突变体的结合蛋白的方法有效

专利信息
申请号: 201710145207.1 申请日: 2017-03-13
公开(公告)号: CN106905435B 公开(公告)日: 2020-04-10
发明(设计)人: 宋波 申请(专利权)人: 武汉海沙百得生物技术有限公司
主分类号: C07K19/00 分类号: C07K19/00;C07K14/31;C12N15/10;C40B40/08;C40B40/10;C40B40/02
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地址: 430075 湖北省武汉市东湖*** 国省代码: 湖北;42
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摘要: 发明涉及一种制备基于蛋白A突变体的结合蛋白的方法。此外,本发明提供编码所述异源多聚体蛋白A突变体的核苷酸文库和对应的蛋白质文库,揭示了从所述突变体文库中筛选对预定靶分子具有结合能力的蛋白A突变体的方法,分离编码所述蛋白A突变体的核苷酸的方法,鉴定和分析所述蛋白A突变体的方法,以及生产所述蛋白A突变体的方法。本发明的方法具有产生更高结合能力的特异性结合蛋白的优点。
搜索关键词: 一种 制备 基于 蛋白 突变体 结合 方法
【主权项】:
一种制备基于蛋白A突变体的结合蛋白的方法,包括下列步骤:a)提供单体经过修饰的蛋白A的异源多聚体突变体的库,所述库包括异源多聚体蛋白质,所述异源多聚体蛋白质包括两个或更多以首尾排列的方式连接在一起的蛋白A单体,其中所述异源多聚体蛋白质的至少两个所述单体是通过对位于SEQ ID No:1中的9、10、11、13、14、17、18、24、25、27、28、32、35处的至少五个氨基酸的替换而进行的修饰,所述修饰的单体蛋白质与未修饰的蛋白A具有至少80%的氨基酸序列一致性;b)为所述经过修饰的蛋白A的库提供潜在的靶分子;c)使所述修饰的蛋白质的库与所述靶分子接触;d)通过筛选方法得到异源多聚体蛋白A突变体,所述突变体以KD范围是10‑7‑10‑12M的亲和力结合于所述靶分子。
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