[发明专利]多重荧光定量PCR的方法有效
| 申请号： | 201710121610.0 | 申请日： | 2017-03-02 |
| 公开（公告）号： | CN106868140B | 公开（公告）日： | 2022-10-18 |
| 发明（设计）人： | 虞之龙;刘玚;邱海维 | 申请（专利权）人： | 北京酷搏科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6851 | 分类号： | C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 | 代理人： | 赵囡囡;吴贵明 |
| 地址： | 100871 北京市海淀区*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种多重荧光定量PCR的方法。该方法包括：将多个目标片段的扩增引物对置于同一扩增体系中进行PCR扩增，PCR扩增包括N轮热循环，10≤N≤50；每轮热循环后对PCR产物进行程序升温，获得多个目标PCR扩增片段形成的混合片段的熔解曲线；计算每一轮PCR热循环后各单一目标片段的含量，进而建立各单一目标片段的含量随PCR热循环次数增加而变化的扩增曲线；根据扩增曲线计算得到各单一目标片段对应的Ct值，进而根据Ct值计算得到各单一目标片段的起始浓度。该方法能利用单个光学采集通道的数据实现对各目标扩增片段进行准确检测和定量，且不受目标片段数量、多个目标片段的解链温度是否已知或是否接近的限制。 | ||
| 搜索关键词： | 多重 荧光 定量 pcr 方法 | ||
【主权项】：
一种多重荧光定量PCR的方法，其特征在于，所述方法包括：将多个目标片段的扩增引物对置于同一扩增体系中进行PCR扩增，所述PCR扩增包括N轮PCR热循环，10≤N≤50；每一轮PCR热循环后，对PCR产物进行程序升温，获得所述多个目标片段形成的混合片段的熔解曲线；根据所述混合片段的熔解曲线，计算所述每一轮PCR热循环后各单一目标片段的含量，进而建立各单一目标片段的含量随PCR热循环次数增加而变化的扩增曲线；根据各单一目标片段的扩增曲线计算得到各单一目标片段对应的Ct值，进而根据所述Ct值计算得到各单一目标片段的起始浓度。
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