[发明专利]一种结核杆菌的检测方法在审
| 申请号： | 201710112474.9 | 申请日： | 2017-02-28 |
| 公开（公告）号： | CN106755533A | 公开（公告）日： | 2017-05-31 |
| 发明（设计）人： | 崔俊伟;张边防;蔡瑞艳;高渐联;周爱杰;王永亮;刘传宝;李振云;高景利;石卓林 | 申请（专利权）人： | 新乡医学院第一附属医院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/01 |
| 代理公司： | 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙)61223 | 代理人： | 潘宏伟 |
| 地址： | 453100 河南省新乡市*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明公开了医学检测技术领域的一种结核杆菌的检测方法，该结核杆菌的检测方法的具体步骤如下S1提取患者晨痰；S2去上清液留沉淀待检；S3取上清液3μL待检；S4按94℃ 40s，64℃ 60s扩增35个循环；S5经电泳处理后在紫外灯下观察结果，若240bp处出现橙黄色条带，则该结核杆菌为阳性，本发明只需极少数的细菌即可获得结核杆菌的阳性结果，采用聚合酶链式反应，可在试管内将检测的目的基因在很短的时间内扩增几十万倍乃至上百万倍，大大提高了基因诊断的灵敏性，降低了分析难度。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 结核杆菌 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种结核杆菌的检测方法，其特征在于：该结核杆菌的检测方法的具体步骤如下：S1：提取患者晨痰，并将晨痰置于无菌密封瓶中加入处理液制作成痰液标本，待检；S2：在痰液标本中加入1mol/L的氢氧化钠溶液处理3～5min，混匀后取0.5mol/L的标本14000～16000r/min离心10min，去上清液留沉淀待检；S3：将步骤S2中的沉淀物与1～3ml的蒸馏水混匀后，再15000～17000r/min离心4～6min，置90～110℃沸水浴13～15min，取上清液3μL待检；S4：提取3μL步骤S3中的上清液，在上清液中加入反应液15～25μL和Taq酶1μL，混匀后稍加离心，并在其表面滴2～5滴消毒液，置94℃预变性2～4min，再按94℃40s，64℃60s扩增35个循环；S5：扩增结束后，在反应管中加入4～6μL溴酚蓝终止反应，取15μL反应液，经电泳处理后在紫外灯下观察结果，若240bp处出现橙黄色条带，则该结核杆菌为阳性。
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