[发明专利]肿瘤免疫治疗中微卫星不稳定状态分析体系

摘要

本发明涉及的微卫星不稳定状态分析，可作为肿瘤免疫治疗(PD‑1/PD‑L1)的辅助诊断标志物，属于生物技术领域。本发明是基于荧光PCR平台检测人肿瘤细胞微卫星不稳定性，选取了5个文献和国际上报道较多的单核苷酸重复位点(NR‑21、NR‑24、BAT‑25、BAT‑26、MONO27)对微卫星不稳定状态进行分析。同时，选取了2个五核苷酸重复位点(Penta C和Penta D)作为样品的质控，主要用来检测样品的混淆和污染。本发明使用荧光标记的引物，同时扩增7个位点，相比其他产品，扩增条件简化，可在常用PCR设备上进行，结合毛细管电泳分析，信号更强，操作简单，经济实惠，能够短时间内检测出接受或即将接受肿瘤免疫治疗(PD‑1/PD‑L1)病人的微卫星不稳定状态，尽快的为临床治疗作出指导意义。

主权项

作为用于肿瘤免疫治疗(PD‑1/PD‑L1)的辅助诊断标志物检测的微卫星不稳定状态分析体系，该体系所用的扩增引物组合能够同时扩增单核苷酸重复位点(NR‑21、NR‑24、BAT‑25、BAT‑26、MONO27)和五核苷酸重复位点(Penta C和Penta D)，所述的每一个位点均由一对引物扩增，这7个扩增引物对分别为：NR‑21引物：上游引物：GGAGTCGCTGGCACAGTTCTAT，下游引物：CTTTCTGGTCACTCGCGTTTAC；NR‑24引物：上游引物：CCCCATTGCTGAATTTTACCTC，下游引物：GAGATTGTGCCATTGCATTCC；BAT‑25引物：上游引物：CTCGCCTCCAAGAATGTAAGTG，下游引物：GACATTCTGCATTTTAACTATGGCTC；BAT‑26引物：上游引物：GAAATTGGATATTGCAGCAGTCAG，下游引物：GCTCCTTTATAAGCTTCTTCAGTATATGTC；MONO‑27引物：上游引物：GCAGGGAAATGGTGGGAACC，下游引物：AGGGTGGATCAAATTTCACTTGG；Penta C引物：上游引物：GAGCTGGAGGTTGCATTCAG，下游引物：TGAGCTACAATGGTTATCACCTG；Penta D引物：上游引物：GGAAGGTCGAAGCTGAAGTGAG，下游引物：TTGCCTAACCTATGGTCATAACG。